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实验十：果蔬中维生素C的测定（2，6—二氯靛酚滴定法） 教学目的要求 基本知识点 1、了解从果蔬中提取的方法 2、2，6—二氯靛酚滴定法测定果蔬中VC的基本过程和操作关键。 3、检查学生实验准备情况。 【引入新课】 VC在人体内的主要功能是：参加体内的氧化还原过程，促进人体的生长发育，增强人体对疾病的抵抗能力，促进细胞间质中胶原的形成，维持牙齿、骨骼、血管和肌肉的正常功能，增强肝脏的解毒能力。当人体中缺少VC时，就会出现牙龈出血、牙齿松动、骨骼脆弱、粘膜及皮下易出血、伤口不易愈合等症状。近年来，科学家们还发现，VC能阻止亚硝酸盐和仲胺在胃内结合成致癌物质—亚脱胺，从而减低癌的发病率。 据测定，成年男子每天约需VC 65 mg，成年女子每天约需VC 60 mg。 VC广泛存在于植物组织中，新鲜的水果、蔬菜，特别是猕猴桃、鲜枣、草莓、枇杷、橙、橘、柿子等含有丰富的。以100水果的的含量来计算，猕猴桃含420，鲜枣含380，草莓含80，橙含49，枇杷含36，橘含30，柿子含30。但葡萄、无花果、苹果各自只有5，香蕉、桃子各含10，梨子仅含4。C是人类营养中最重要的维生素之一，缺少它时会产生坏血病，因此又称为抗坏血酸（ascorbic acid）。化学名称为：L-3-氧代苏己糖醛酸内酯英文名：Ascorbic Acid(INN)，分子式为 C6H8O6 176.13。C：抗坏血酸（还原型VC）和脱氢抗坏血酸（氧化型DHVC, 抗坏血酸易氧化成脱氢抗坏血酸，脱氢抗坏血酸又易还原成抗坏血酸。抗坏血酸的生理活性 图1　维生素C的构造式及其氧化还原 异抗坏血酸是抗坏血酸的异构体,化学性质与抗坏血酸相似,易被吸收，但几乎没有抗坏血酸的生理活性（仅约二十分之一)。异抗坏血酸和抗坏血酸棕榈酸酯只用作抗氧化剂，防止食品变质、水果变色以及腌肉。2,6-二氯酚靛酚（DCPIP），本身则氧化为脱氢型。在酸性溶液中，2,6-二氯酚靛酚呈红色，还原后变为无色。因此，当用此染料滴定含有维生素C的酸性溶液时，维生素C尚未全部被氧化前，则滴下的染料立即被还原成无色。一旦溶液中的维生素C已全部被氧化时，则滴下的染料立即使溶液变成粉红色。所以，当溶液从无色变成微红色时即表示溶液中的维生素C刚刚全部被氧化，此时即为滴定终点。如无其它杂质干扰，样品提取液所还原的标准染料量与样品中所含还原型抗坏血酸量成正比。 本法用于测定还原型抗坏血酸，测定总抗坏血酸含量常用2,4-二硝基苯肼法和荧光分光光度法测定。 三、材料 猕猴桃、黄瓜、卷心菜各500g。 四、仪器： 1、研钵 (1个/2组) 【代替高速组织捣碎机:8000 r/min～12000r/min】 2、扭力天平（感量0.01g）mL移液管（2支/全班） 5、500mL、50mL烧杯（2个//2组） 6、胶头吸管（1支/组） 7、100mL容量瓶（1个/组） 8、细玻璃棒（1支/组） 9、漏斗（1个/组） 10、滤纸（2张/组） 11、10mL、5mL、2mL、1mL移液管（1支/2组） 12、100mL、50mL锥形瓶（3个/组） 13、碱式滴定管（1支/组） 14、电炉（2个/2组） 结合实验想一想，以上列举仪器全面吗？ 五、试剂 1、20g/L草酸溶液：称取20g草酸，加水至1000mL； 2、10g/L草酸溶液：称取10g草酸，加水至1000mL； 3、淀粉指示剂：取1g可溶性淀粉，加10mL冷水调成稀粉浆，倒入正在沸腾的100mL水中，搅拌至透明，放冷备用。 4、60g/L碘化钾溶液。 5、0.0167mol/L KIO3标准溶液：准确称取经105℃烘干2h的基准碘酸钾3.5670g（0.3567 g），用水溶解并稀释至1000mL（100mL）。【KIO3分子量214】 6、1.67×10-4mol/L KIO3标准溶液。准确吸取0.0167mol/L KIO3标准溶液1 mL，用水稀释至100 mL。此溶液1mL相当于维生素C 0.088mg。20mg纯L-抗坏血酸，用10g/L草酸溶解，并定容维生素C标准使用液：取维生素C标准贮备液5mL于50mL容量瓶中，用草酸溶液(10g/L)定容。 维生素C标准使用液3～5滴淀粉指示剂 (10g/L)淡蓝色为终点。 式中：C—维生素C的浓度，mg/ mL； V1—滴定时消耗碘酸钾标准溶液的体积，mL； V2—吸取维生素C标准使用液的体积，mL；mL】 0.088—1.00mL碘酸钾标准溶液 () 相当的维生素C的量，mg。：—二氯靛酚溶解于上述碳酸氢钠溶液中，冷却后，移入250mL容量瓶中，用蒸馏水稀释定容。过滤于棕色瓶内，保存于冰箱中。每次使用前，用标准抗坏血酸标定其滴定度。