03动物细胞染色体标本制作及组型实验要点.pptVIP

小鼠染色体标本制作及组型实验 NO. 3 细胞生物学实验 2016.4.13 实验目的 1.通过实验，初步掌握染色体标本的制做方法，进一步了解各操作步骤的原理； 2.通过组型实验，掌握染色体组型分析的基本方法。 实验原理 小鼠精巢细胞分裂旺盛； 秋水仙素使有丝分裂停止在中期； 空气干燥使中期染色体展平； 一、染色体标本的制做 实验原理 染色体组型代表了一个个体或物种的染色体特征； 参数： 分类： 二、染色体组型分析 相对长度 指数 着丝粒指数 染色体的臂数 中央着丝粒染色体 亚中央着丝粒染色体 端部着丝粒染色体 亚端部着丝粒染色体 实验用品 1. 材料：小白鼠。 2. 试剂： 秋水仙素 Carnoys固定液 磷酸缓冲液 3. 器材：显微镜、普通离心机、恒温水浴锅、剪刀、镊子、滴管、量筒、小烧杯、试管架、染色用玻璃板、载玻片、盖玻片。 生理盐水 Giemsa染液 实验方法 一、染色体标本的制做 1. 取小白鼠以每克重注射秋水仙素4?g，注射后14~16h，用断头法杀死小鼠，取出睾丸用生理盐水洗去血污。 2. 把睾丸移入盛有1ml 0.3% KCl的低渗溶液的10ml的小烧杯内，用手术剪将睾丸剪碎(呈乳白色)，将其用铜网过滤至一支10ml刻度离心管中以除去残余组织块，向离心管中加入0.3% KCl低渗溶液至4ml，于37℃水浴中低渗处理30min。 3. 800~1000r/min离