014-2010版中国药典培训回答(第1部分培养基配制)-1..doc

2010版中国药典培训回答（第1部分：培养基配制）广东省药检所对《中国药典》2010版微生物专题培训班的有关问题解答答案。1.含琼脂培养基冷却至25后已凝固，如何测定其pH？答：有专门的固体培养基pH计，如Radiometer A /S, DK22400 Copen2 hagen NV, Denmark 或者Microelectrodes Inc1, NH 03053,U1S1A1 。.2..PH计测培养基的PH好像有比较大的差别，应如何选择PH计？（效价7.8的培养基我用普通理化室的PH计测定只有7.0左右，不知道是否因为在高温下测定（含琼脂）答：培养基应冷却到20～25才可测量，另外PH计应按时校准。3.生物指示剂对灭菌设备的性能，灭菌程序的验证是只验证一次呢，而后进行定期验证，如果生物指示剂换批号，是否要重新验证？答：应定期或不定期验证一次，确保灭菌设备正常。生物指示剂更换批号，不需重新验证。4..紫外线灭菌后，需要多久进去操作？答：打开通风净化设备，半小时后可入内操作。5.孟加拉培养基是否可以取代玫瑰红钠琼脂进行培养霉菌和酵母菌？答：根据中国药典，采用玫瑰红钠琼脂。6.配制PH值7.0氯化钠-蛋白胨缓冲液时有时因为高压灭菌器灭菌过程温度过高而导致培养基混浊了，这种情况缓冲液还能用吗？ 答：建议按正常温度灭菌，混浊培养基建议不要使用。7.培养基在冷藏中形成结晶怎么处理？①销毁 ②加热再用 ③待冷却完用。答：建议不要使用8.融化的培养基为什么不能再冷水中冷却？答：防止受热不均引起结块9.取菌后测PH：（25）培养基配制好测PH，取其中一瓶测PH，那这一瓶测完就不能用了，污染了。答：也可在无菌条件下取出适量测pH.10.配制分装过程中能否使用不锈钢锅？答：我实验室使用不锈钢锅，目前未发现异常。11. 对新购进无菌0.9%氯化钠（500ml）能否再次灭菌？答：能。但包装完好，购入时间较短的无需灭菌。12.“要定期对压力表进行检定（消毒锅），检定周期一般为半年”，这句话怎样理解，是厂家应半年自己检一次，还是有计量部门执行？答：由计量部门计量，计量后应发有检定证书。13. 灭菌后，灭菌锅需自然冷却降压才可以打开，这段时间是否会造成过度灭菌。答：自然冷却过程已经计算在正常灭菌时间内了，不会造成过度灭菌。14. 培养基常规质控有无强制检定项目？目前我们所做项目有：ph、无菌检查、生长检查、是否符合药典规定？答：培养基应按2010版药典检查。15. 培养基所用器具若使用湿热灭菌，是否必须待干燥后才可以使用？若烘干或其它方法，中间过程怎样防止微生物污染？答：答：如果是马上使用且不是用于非水溶性供试液的制备及实验，不一定要烘干；否则，应干燥后使用，灭菌及干燥尽量在同一锅里进行，或用纱布和牛皮纸包扎紧密。16. 培养基的避光储存，是否配置好的培养基其全部放避光储存？答：最好都避光保存。无条件时，光敏感的培养基一定要。17. 商品培养基干粉说是加蒸馏水溶解，实际操作是否可以用纯化水或注射用水？答：只要不含有任何可能抑制或影响微生物生长的物质的水均可。18. 灭菌后的培养基是否都要测ph值？如何测定ph值？答：每个制备批次的培养基都应测定ph，可采用ph试纸或ph计测量。19. 培养基及器具灭菌可否同一设备同灭菌时间进行灭菌？答：最好分开灭菌，条件不允许时可同炉灭菌，前提是都是洁净无污染的。20. 培养基的保温能否用60的培养箱，它与45—55℃水浴锅保温方法有何不同？答：不建议，因为温度不同，长时间高温影响培养基质量。21. 培养基的贮存是否需要放置于2—10冰箱内？答：需冷藏保存的培养基外包装上会写明。22. 培养基灭菌后成份会有所蒸发减少，如何处理这个问题？答：正常情况下蒸发量较少，可忽略不计。23. 培养基融化后出现浑浊是有哪些方面的原因引起的？应如何避免？答：可能的情况有1培养基配置用水不符合规定；2灭菌过程温度升温慢或降温慢；3培养基储存不当；4融化时沸腾时间较长等。24. 准备好的培养基有效期如何验证？答：定期取出培养基验证其无菌性，促生长能力等方面。25. 某些培养基无pH变化范围，应该怎么确定该培养基的pH范围呢？答：向培养基供应商索取。26. 用于环境监控的培养基预培养时间如何确定？答：与正常实验的培养时间应一样。27. 培养基加热的温度一般超过100，是否符合要求？有无时间限制？答：答：是指哪个环节？培养基灭菌温度规定是超过100，有具体的时间要求，如果是指固体培养基使用前的加热熔化，则完全融化即可，避免长时间高