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2017-01-11 发布于浙江
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PEG法检测循环免疫复合物课件.ppt

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PEG法检测循环免疫复合物课件

PEG法检测循环免疫复合物免疫研究所梁亚玲【实验目的】掌握PEG法测定循环免疫复合物(CIC)的实验步骤、影响因素，结果判断标准和计算方法；了解循环免疫复合物测定的临床意义。【实验原理】低浓度（2 ~5%)的聚乙二醇（PEG) 能选择性沉淀免疫复合物。在受检血清中加入PEG，使最终浓度为3.5%，可将血清中免疫复合物沉淀下来，需用分光光度计测定沉淀量，用光密度(O·D)表示其相对量。本法简便易行，国内己广泛应用。【试剂与材料】 1、0.1mol/L硼酸缓冲液：称取硼砂0.4g，硼酸0.51g，溶于100ml蒸馏水中，调PH至8.6。 2、4.166%PEG溶液：用硼酸缓冲液配制。PEG的分子量为6000。 3、受检血清，试管，721分光光度计。实验方法 1.吸待检血清0.2ml，用硼酸缓冲液0.4ml稀释（血清稀释3倍）。 2.分对照管和测定管：对照管：硼酸缓冲液2ml＋稀释血清0.22ml；测定管：4.166％PEG2ml+稀释血清0.22ml（此时PEG最终浓度为3.75％）混匀后两管均放4 °C冰箱1h后取出，室温放置10~15min。用0.5×1cm比色杯在分光光度计上测两管A495nm值，以硼酸缓冲液调零。结果判断待测血清浊度值＝（测定管A－对照管A)×100 实验讨论注意在本试验中要求的PEG终浓度为何为3.75％。受检查血清为何要一定保持新鲜，放冰箱保存不得超过一周（因为即使没有污染，也因血清中聚合IgG的形成而出现假阳性）。 * *