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植物组织培养过程解析
植物组织培养过程中的影响因素 培养基成分 为了满足植物的正常生长和发育, 培养基中需要加入适量的矿物质成分, 而这些矿物质主要来源于无机盐。 不同的培养基配方, 其无机盐养分的含量和化合物种类不同。这些无机盐组成各种化合物, 参与机体的建造, 构成一些特殊的生理活性物质, 参与活跃的新陈代谢; 这些元素之间互相协调, 以维持离子浓度的平衡、胶体的稳定、电荷的平衡等电化学方面的作用, 在发育方面, 一定的元素影响到形态发生和组织、器官的建成。 植物生长所需要的养分不足则生长缓慢, 或发生缺素症状, 影响快繁生产, 养分过剩则会引起盐害。? 碳源 碳源主要包括糖类物质、醇类物质和有机酸,以糖类物质最为重要。糖是重要的能源物质, 是植物组织培养条件下生长发育不必不可少的物质。对多数植物来说, 蔗糖是最好的碳源其次是果糖和葡萄糖。 过去的研究一直表明组培中必须加入糖作为培养材料的碳素营养供给, 日本千叶大学古在丰树教授最早研究开发一种新的无糖植物组培技术。他首先研究发现容器中的小植株也具有光合自养能力, 从而考虑改变植株的营养方式以CO2 作为植株的碳源,同时改善植株的生理和能量代谢, 使植株更好的发挥自身的光合能力, 降低生产成本。? 植物生长调节剂? 物器官分化是由两类激素, 生长素和细胞分裂素的相互作用控制的, 器官分化的性质是由这两种激素的相对浓度决定的, 当细胞分裂素与生长素的比值较大时, 可以促进芽的形成; 当细胞分裂素与生长素的比值较小时, 有得于根的分化。 常见的生长素有NAA、IAA、IBA、GA、2, 4- D 等,各种生长素其作用和效果并不一样, 2, 4- D 的用量较高时会抑制形态发生的过程, 而且它的后效持久, 一般在低浓度下使 ?外植体的选择? 植物不同的器官和组织, 对离体培养的反映是不同的, 其形态发生的能力也是不同的。外植体的种类是影响组织培养效果的主要因素之一。即使是相同的器官, 由于其生理学或发育年龄的差异, 也会影响形态发生的类型及方式。同一植株上不同器官的再生能力有所不同, 许多植物茎段愈伤组织诱导率高于叶片。外植体脱分化难易程度与其生理状态有关。? 外植体的年龄对组织的再生能力有很大的影响。通常植株的幼嫩组织, 如胚、子叶、实生苗的嫩茎和嫩芽、幼龄植株上的组织作为外植体要比老龄化植株上的组织容易诱导成功。一般情况下, 外植体越幼嫩就越容易获得再生植株。 外植体的选择和处理对褐变有较大影响。其中研究人员分析了欧洲栗的酚类含量的变化, 结果表明, 幼龄材料酚类化合物含量少, 而成龄材料比较多。 不同季节取材, 对植株的再生能力影响差异很大, 通常春季是植物生长旺季, 植株再生能力也最强, 是进行组织培养的最适季。? 除了上述因素对植物组织培养中体细胞无性系的建立有广泛的影响外, 其它诸如培养条件( 包括通气状况、光线、温度) 、培养时间、材料处理、接种方式、实验人员的经验以及继代时间的长短等因素也影响到培养时胚性愈伤组织的发生频率和质量, 从而影响组织培养再生体系的建立。? 因此深入系统地研究各种植物的组织培养再生体系建立的条件和各个影响因素, 对于完善生物技术的理论体系, 扩大其应用成果, 均有着重要意 谢 谢 * *
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