实验：观察根尖分生组织细胞的有丝分裂探究.pptVIP

1.生根培养：将切除老根的洋葱或 大蒜的磷基置于盛水 的小烧杯上， 于22－25℃下进行生根培养。 实验：观察根尖分生组织细胞的有丝分裂 一、实验原理: 1、 高等植物体内，有丝分裂常见根尖、茎尖等分生区细胞。各个细胞的分裂是独立的。通过在显微镜下观察各个时期细胞内染色体（染色质）的存在状态，判断这些细胞各处于有丝分裂的哪个时期（间期、前期、中期、后期和末期）。 2、碱性染料（龙胆紫溶液或醋酸洋红液）能将染色体（或染色质）染成深色。 3、盐酸使植物细胞之间的果胶质层松散，用盐酸处理植物的根尖，可以使根尖细胞彼此容易分离。 二、材料用具： 1、洋葱（或大蒜）根尖， 2、显微镜、载玻片、盖玻片、镊子、滴管等， 3、解离固定液 ：盐酸和酒精混合液(1:1） 4、染色：龙胆紫溶液（或醋酸洋红液） 三、实验步骤 磷 基 培养根尖：应每天换水 (防止水中缺氧烂根) ②取材：取生长旺盛、带有分生区的根尖，长度为根尖的2-3mm。 ③解离：解离液（15%盐酸∶95%酒精溶液＝1∶1）； 时间：室温3-5分钟，至根尖酥软； 目的：使组织细胞分离开，杀死并固定细胞 漂洗 ④漂洗：用清水漂洗10min，目的是洗去组织中的解 离液，便于染色(防止酸碱中和)。 染色 ⑤染色：染液（0.01g/mL的龙胆紫或0.02g/mL的醋酸洋红）;时间为3－5分钟；目的是使染色体或染色质被碱性染料染成深色，便于观察。 制片 ⑥压片：目的是使细胞分散开。方法（用镊子弄碎根尖，盖上盖玻片，再放上一块载玻片，压片）（压片过重过猛可能将组织压碎、压烂；过轻则细胞未充分分散开而重叠。） ⑦低倍镜观察：找到分生区细胞（特点：细胞呈正方形，排列紧密，有的细胞正在分裂） ⑧高倍镜观察：找各时期细胞。可见处于间期的细胞最多，中期最少。不能看到某个细胞连续分裂的过程，因细胞在解离时已被杀死。 看一看植物细胞的分裂（根尖） 根冠 分生区 伸长区 成熟区 根尖纵剖结构示意图 3、装片的制作： 解离 漂洗 染色 制片 盐 酸 使植物细胞之间的果胶质层松散，细胞相互分离 放入请水中漂洗 洗去盐酸，便于碱性染料染色 龙胆紫溶液或醋酸洋红等碱性染料 使染色体着色，便于显微镜下观察 用镊子压扁，加盖玻片,再加载玻片压散细胞 使细胞分散开 观察 先用低倍镜观察 在低倍镜下找到分生区细胞；正方形、排列紧密 依次观察分裂中期、前期、后期、末期、的细胞间期、 再用高倍镜观察 4、显微镜观察： 思考： ⑴为何只截取根尖2—3mm？ 有利于找到分生区细胞 ⑵解离的目的： 使组织中的细胞相互分离开。 ⑶漂洗的目的： 洗去药液，防止解离过度。 ⑷用碱性染料染色目的： 使染色质和染色体着色，便于观察。 ⑸制片的目的： 使细胞分散开（成一层细胞），利于观察。 （6）分生区的特点是什么？ （7）本实验所观察到的细胞还能继续分裂吗？ 细胞小，排列密而整齐，细胞壁薄，细胞核大，细胞质浓，无液泡。具有很强的分裂能力，能够不断的分裂产生新细胞，再由这些细胞分化形成其他组织。 原本细胞都是叠加在一起的，在显微镜下很难观察清楚，酒精和盐酸就是使细胞分散分离并杀死细胞，显微镜观察的是死亡的细胞那时处于的状态，所以，有的细胞正处于中期，有的处于间期。 已知一个完整的细胞周期划分为分裂间期和分裂期(M期)，其中分裂间期又分为G1期(DNA复制前期)、S期(DNA复制期)和G2期(DNA复制后期)。回答下列有关动物细胞培养的问题： 1)培养中的细胞其数目的增加和培养时间的关系如图甲。据图读出该细胞完成一个细胞周期所需的时间(T)是________h。 (2)从图甲的A点取出6 000个细胞，测定每个细胞的DNA含量，结果如图乙。图乙的B、C、D中，表示处于S期的是________，表示处于G2期和M期的是________，表示处于G1期的是________。 (3)若取样的6 000个细胞中，处于M期细胞的数目是300个，则处于S期和G2期的细胞数分别是________个和________个。 (4)细胞周期中，完成各期所需时间的计算公式是t＝T×(N是取样的总细胞数，n是各期的细胞数)，则该细胞完成分裂期和间期的时间分别是________h和________h。 20 C D B 1500 1200 1 19 取生长健壮的小麦根尖，经过解离、漂洗、染色、制片过程，制成临时装片，放在显微镜下观察。欲观察到细胞有丝分裂的前、中、后、末几个时期 课 堂 练 习 A．应该选一个处于间期的细胞，持续观察它从间期到末期的全过程 B．如果在低倍镜下看不到细胞，可改用高倍物镜继续观察 C．