人教版高中生物选修三1.2《基因工程的基本操作程序》课件（共18张）.pptVIP

三、将目的基因导入受体细胞 （一）转化： （二）方法 将目的基因导入植物细胞 将目的基因导入动物细胞 将目的基因导入微生物细胞 农杆菌转化法 基因枪法 花粉管通道法 ——显微注射法 ——感受态细胞 目的基因进入_________内，并且在受体细胞内维持_____和_____的过程 受体细胞 稳定 表达 四、目的基因的检测与鉴定 （一）、检测 1、检测转基因生物染色体的DNA上是否插入了目的基因 (关键步骤) ① 首先取出转基因生物的基因组DNA ② 用含目的基因的DNA片段用放射性同位素等作标记,以此做探针 ③ 使探针和转基因生物的基因组杂交,若显示出杂交带,表明染色体已插入染色体DNA中 （1）方法: DNA分子杂交 （2）过程: 2、检测目的基因是否转录出了mRNA 3、检测目的基因是否翻译成蛋白质 （1）方法： 分子杂交 方法： 抗原抗体杂交 （2）过程： 用上述探针和转基因生物的mRNA杂交，若出现杂交带,表明目的基因转录出了mRNA。 （二）、鉴定（个体生物学水平） 抗虫鉴定、抗病鉴定、活性鉴定等 获取目的基因 从基因文库 利用PCR 化学方法人工合成 构建基因表达载体 目的基因、启动子、终止子、标记基因 将目的基因导入受体细胞 农杆菌转化法、显微注射法 目的基因的检测与鉴定 检测：是否插入、转录、翻译 鉴定 1.在基因工程中使用的限制性核酸内切酶，其作用是（ ） A.将目的基因从染色体上切割出来 B.识别并切割特定的DNA核苷酸序列 C.将目的基因与运载体结合 D.将目的基因导入受体细胞 B 2.基因工程是DNA分子水平的操作，下列有关基因工程的叙述中，错误的是（ ） A.限制酶只用于切割获取目的基因 B.载体与目的基因必须用同一种限制酶处理 C.基因工程所用的工具酶是限制酶、DNA连接酶 D.带有目的基因的载体是否进入受体细胞需检测 A 3.运用现代生物技术，将苏云金芽孢杆菌的抗虫基因整合到棉花细胞中，为检测实验是否成功，最方便的方法是检测棉花植株是否有（ ） A.抗虫基因　　B.抗虫基因产物 C.新的细胞核　D.相应性状 4.转基因动物转基因时的受体细胞是（ ） A.受精卵　　　B.精细胞　　　 C.卵细胞　　　D.体细胞 D A 5.质粒是基因工程最常用的运载体，它的主要特点是：( ) ①能自主复制　 ②不能自主复制　 ③结构很小④蛋白质　 ⑤环状RNA　 ⑥环状DNA⑦能“友好”地“借居” A.①③⑤⑦　 B.②④⑥C.①③⑥⑦　 D.②③⑥⑦ C 退出 随堂测试 新课导入 学习目标 新知探究 课堂小结 1.限制性内切酶 1.2 基因工程的基本操作程序 将大鼠的生长激素基因导入到小鼠受精卵中，得到的“超级鼠”。 1.简述基础理论研究和技术进步催化了基因工程； 2.简述基因工程的原理和基本步骤。 1、目的基因的获取 2、基因表达载体的构建 3、将目的基因导入受体细胞 4、目的基因的检测与鉴定 一、目的基因的获取 人工合成 利用PCR技术扩增 已知序列： 从基因文库获得 未知序列： ( DNA library ) 聚合酶链式反应(Polymerase Chain Reaction) 鸟枪法：散弹射击法 供体细胞DNA 限制酶 许多DNA片段 载入 运载体 导入 受体细胞 扩增 产生特定性状 分离 目的基因 从基因文库获得 基因DNA文库的构建 将总DNA经过酶解，分离不同长短的DNA片段。包含基因片段分别克隆在质粒或噬菌体载体上，转染细菌或体外包装到噬菌体颗粒上便构成了该生物的基因文库。 目的基因的mRNA 逆转录 单链DNA 合成 双链DNA（目的基因） 蛋白质氨基酸序列 推测 mRNA的核苷酸序列 推测 结构基因的核苷酸序列 化学合成 目的基因 人工合成法 逆转录法 根据已知氨基酸序列直接合成DNA 二、基因表达载体的构建 质粒 DNA分子 限制性核酸内切酶处理 两个切口获 得目的基因 DNA连接酶 重组DNA分子（重组质粒） 同一种 一个切口两 个黏性末端 随堂测试 新课导入 学习目标 新知探究 课堂小结 1.限制性内切酶