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微生物复习点.
第六章
1生长:生物原生质体总量(重量、体积、大小)有规律、不可逆增加的生物过程(同化作用速度超过异化作用)
2繁殖:微生物生长到一定阶段,由于细胞内各种细胞结构的重建产生新的生命个体,引起生物个体数目增加的生物学过程。
3群体生长=个体生长+个体繁殖
4生长测量方法(1)直接法:称干重法:精确
测体积法:粗放,测沉降量
(2)间接法:比浊法:450~650nm的OD值
生理指标法:测含N量法等
5繁殖数测量方法(1)直接法:计数板计数:总菌数 / (活菌染色)
(2)间接法:平板菌落计数板:菌落形成单位(CFU)×稀释度
6同步培养:即设法使某一群体中的所有个体细胞尽可能都处于同样细胞生长和分裂周期中,然后通过分析此群体在各阶段的生物化学特性变化,来间接了解单个细胞的相应变化规律。
7同步生长:通过同步培养的手段而使细胞群体中各个体处于分裂步调一致的生长状态。
8生长曲线:在封闭的培养系统里,以培养时间为横坐标,以细胞数目的对数值为纵坐标,定量描述液体培养基中微生物群体生长规律的实验曲线。
9生长曲线分为:
1)延滞期特点:
生长速率常数R≈0 ;
细胞体积增大或拉长;
细胞内RNA,尤其是rRNA的含量很高,原生质呈碱性;
合成代谢十分活跃
抗性降低,对不良环境因素敏感。
2)对数期特点
生长速度最快,代时(G)最短;
细胞稳定, 平衡生长,菌体成分均匀;
酶活性高,代谢稳定。
3)稳定期特点:
生长速率常数R=0,达到正生长与负生长相等的动态平衡;
菌体产量达到最高点;
菌体产量与营养物质的消耗间呈现出有规律的比例关系。
胞内储藏物开始形成(肝糖粒、脂肪粒等);
芽孢杆菌一般在这时开始形成芽孢;
积累次级代谢产物(又称稳定期产物),如抗生素、维生素等。
4)衰亡期特点:
生长速率负增长;
细胞形态多样,出现畸形,形成衰退型;
蛋白水解酶活跃,出现细胞自溶现象;
芽孢细菌芽孢大量释放。
10连续培养:在培养微生物时,不断流进新鲜培养基,并以溢流方式不断流出培养物,使生长达到动态平衡,其中的微生物可长期维持在指数生长期,这种培养方式也称为开放培养。
11单批培养:指将微生物置于一定容积的培养基中经过培养生长,最后一次收获的培养方式,也称分批培养、密闭培养。
12连续培养按控制方式分:
恒化器法:控制恒定的流速,使由于细菌生长而耗去的营养物质及时得到补充,培养基中营养物浓度基本恒定,并使微生物始终在低于其最高生长速率的条件下进行生长繁殖的连续培养。(流速不变)
恒浊器法:通过光电控制系统调节培养液的流速,控制细菌培养液菌体密度的恒定,以取得菌体密度高、浓度恒定的连续培养方法。(密度不变)
13稀释率(D)=f(流速)/V(容积)
14影响微生物生长的主要因素:
温度:1)最低生长温度
2)最适生长温度:嗜冷菌、中温菌、嗜热菌
3)最高生长温度
(2)氧气:1)好氧菌:专性好氧菌、兼性好氧菌、微好氧菌
2)厌氧菌:耐氧菌、严格厌氧菌
(3)pH:
配置培养基时调整pH的措施:缓冲能力
15所有细菌生长都需要氧吗?为什么?
厌氧菌缺乏SOD(超氧化物歧化酶)、过氧化氢酶,不能解除氧代谢产物(过氧化氢、超氧阴离子自由基O2-)的毒性而死亡(并非被氧气杀死)。
16控制有害微生物的方法:1)物理:pH、干燥、温度、辐射
2)化学:表面消毒机、防腐剂、抗生素
17厌氧三大技术:亨盖特滚管技术、厌氧罐、厌氧手套箱
18灭菌:采用强烈的理化因素使任何物体内外部的一切微生物永远丧失其生长繁殖能力的措施。
19消毒:采用温和的理化因素,仅杀死物体表面或内部一部分有害的病原菌。
20防腐:通过制菌作用防治食品、生物制品等对象发生霉腐的措施。
21化疗:对病原菌具高度毒力而对其宿主基本无毒的化学物质来抑制宿主体内病原微生物的生长繁殖。
22高温灭菌:(1)干热灭菌法:火焰灼烧法
烘箱内热空气灭菌法(150-170℃,2h)
(2)湿热灭菌法:1)常压下:巴氏消毒法(163℃,30min)
煮沸消毒法(100℃,15min以上)
间歇灭菌法(80-100℃,15-30min)
2)加压下:常规加压灭菌法(121℃,15-
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