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微生物第三四五章总结.

病毒和亚病毒因子现代病毒学家已把病毒这类非细胞生物分成真病毒和亚病毒两大类。真病毒:至少含有核酸和蛋白质两种成分。亚病毒:分为类病毒,拟病毒,卫星病毒,卫星RNA和朊病毒。第一节:病毒一.概述病毒是一类由核酸和蛋白质等少数几种成分组成的超显微“非细胞生物” ,其本质是一种只含 DNA 或 RNA 的遗传因子, 它们能以感染态和非感染态两种状态存在。绝大多数的病毒都是能通过细菌滤器的微小颗粒, 它们的直径多数在 100 nm上下, 因此,可粗略地记住病毒、细菌和真菌这 3 类微生物个体直径比约为 1∶10∶100二.病毒的形态及核酸1.病毒粒有时也称病毒颗粒或病毒粒子,专指成熟的、结构完整的和有感染性的单个病毒。病毒粒的基本成分是核酸和蛋白质。核酸位于它的中心,称为核心或基因组,蛋白质包围在核心周围, 形成了衣壳。衣壳是病毒粒的主要支架结构和抗原成分, 有保护核酸等作用。衣壳是由许多 在电镜下可辨别的形态学亚单位——衣壳粒所构成。2.病毒粒的对称体制病毒粒的对称体制只有两种,即螺旋对称和二十面体对称。另一些结构较复杂的病毒,实质上是上述两种对称相结合的结果, 故称作复合对称。螺旋对称的代表是烟草花叶病毒(TMV),二十面体对称的代表是腺病毒,复合对称的代表是T偶数噬菌体。3.病毒的群体形态动、植物细胞中的病毒包涵体;由噬菌体在菌苔上形成的“负菌落”即噬菌斑,由动物病毒在宿主单层细胞培养物上形成的空斑,以及由植物病毒在植物叶片上形成的枯斑等。4.病毒的核酸病毒核酸的种类很多,是病毒系统分类中最可靠的分子基础, 主要有以下几个指标:①是 DNA 还是 RNA②是单链(ss)还是双链(ds)③呈线状还是环状④是闭环还是缺口环⑤基因组是单分子、双分子、三分子还是多分子⑥核酸的碱基、或碱基对(bp)数, 以及核苷酸序列等。三.噬菌体及其繁殖方式1.T偶数噬菌体由头部、颈部和尾部3部分构成。由于头部呈二十面体对称而尾部呈螺旋对称,故是一种复合对称结构。尾部由尾鞘、尾管、基板、刺突和尾丝5部分组成。2.噬菌体的繁殖方式与其他细胞型的微生物不同,噬菌体和一切病毒粒并不存在个体的生长过程, 而只有 其两种基本成分的合成和进一步的装配过程,所以同种病毒粒间并没有年龄和大小之别。噬菌体的繁殖一般分为5个阶段, 即吸附、侵入、增殖(复制与生物合成)、成熟(装配)和裂解(释放)。凡在短时间内能连续完成以上 5 个阶段而实现其繁殖的噬菌体, 称为烈性噬菌体, 反之则称为温和噬菌体。烈性噬菌体所经历的繁殖过程, 称为裂解性周期。***与裂解现象相似的现象象为自外裂解, 是指大量噬菌体吸附在同一宿主细胞表面并释放众多的溶菌酶, 最终因外在的原因而导致细胞裂解。这种自外裂解是不可能导致大量子代噬菌体产生的。3.噬菌体效价的测定效价这一名词在不同的场合有不同的涵义。在这里,效价表示每毫升试样中所含有的具侵染性的噬菌体粒子数, 又称噬菌斑形成单位数(pfu)。测定效价的方法很多, 较常用且较精确的方法称为双层平板法。用双层平板法测出的效价比用电镜直接记数得到的效价低。前者是计有感染力的噬菌体粒子,后者是计噬菌体的总数。双层平板的底层平板为2%琼脂培养基,上层平板由三部分组成:1%琼脂培养基,宿主菌悬液,噬菌体试样。4.一步生长曲线它可反映每种噬菌体(或病毒)的 3 个最重要的特征参数:潜伏期、裂解期和裂解量。(1)潜伏期 指噬菌体的核酸侵入宿主细胞后至第一个噬菌体粒子装配前的一段时间。它又可分为两段: ①隐晦期:指在潜伏期前期人为地(用氯仿等)裂解宿主细胞后,此裂解液仍无侵染性的一段时间,这时细胞内正处于复制噬菌体核酸和合成 其蛋白质衣壳的阶段。②胞内累积期:指在隐晦期后, 若人为地裂解细胞, 其裂解液已呈现侵染性的一段时间,这意味着细胞内已 开始装配噬菌体粒子,并可用电镜观察到。 (2)裂解期:指溶液中噬菌体粒子急剧增多的一 段时间。(3)平稳期:溶液中噬菌体总数达到最高点后的时期。*一步生长曲线的基本实验步骤为:用噬菌体的稀释液去感染高浓度的宿主细胞, 以保证每个细胞所吸附的噬菌体至多只有一个。经数分钟吸附后, 在混合液中加入适量的相 应抗血清,借以中和尚未吸附的噬菌体。然后用保温的培养液稀释此混合液, 同时终止抗血清的作用,随即置于适宜的温度下培养。其间每隔数分钟取样, 连续测定其效价, 再把 结果绘制成图即可。5.溶源性:温和噬菌体侵入相应宿主细胞后, 由于前者的基因组整合到后者的基因组上,并随后者的复制而进行同步复制, 因此,这种温和噬菌体的侵入并不引起宿主细胞裂解,此即称溶源性或溶源现象。温和噬菌体十分常见,例如 E .coli的λ噬菌体。含有温和噬菌体的DNA 而又找不到形态上可见的噬菌体粒子的宿主细菌叫溶源菌。检验某菌株是否为溶源菌的方法,是将少量溶

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