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* * 全国高等医药院校医学检验专业规划教材 临床生物化学检验实验指导 （第二版） * 全国高等医药院校医学检验专业规划教材 临床生物化学检验实验指导 （第二版） 实验12 透射比浊法测定C反应蛋白 北华大学医学检验学院　赵云冬 实验 12 透射比浊法测定C反应蛋白 Evaluation only. Created with Aspose.Slides for .NET 3.5 Client Profile 5.2.0.0. Copyright 2004-2011 Aspose Pty Ltd. 实验目的 掌握：透射比浊法测定C反应蛋白（CRP）原理。 熟悉：透射比浊法测定CRP试剂成分。 Evaluation only. Created with Aspose.Slides for .NET 3.5 Client Profile 5.2.0.0. Copyright 2004-2011 Aspose Pty Ltd. 实验原理 光线通过浑浊介质溶液时，一部分被混浊颗粒吸收，吸收的多少与混浊颗粒的量成正比，这种测定光吸收量的方法称为透射比浊法。 免疫透射比浊法是利用抗原和抗体的特异性结合形成复合物，通过测定复合物形成量的多少对抗原或抗体进行定量的方法。 使用抗CRP抗体和样品中的CRP进行抗原-抗体反应。反应完成后，用透射比浊法检测吸光度的变化反映CRP浓度。 Evaluation only. Created with Aspose.Slides for .NET 3.5 Client Profile 5.2.0.0. Copyright 2004-2011 Aspose Pty Ltd. 试剂与器材 1．试剂Ⅰ（R1） ①100 mmol/L Tris缓冲液（pH7.5）； ②聚乙二醇； ③0.95g/L叠氮钠。 2．试剂Ⅱ（R2） ①100 mmol/L Tris缓冲液（pH8.0）； ②羊抗人CRP抗血清； ③0.95g/L叠氮钠。 3．仪器 自动生化分析仪。 Evaluation only. Created with Aspose.Slides for .NET 3.5 Client Profile 5.2.0.0. Copyright 2004-2011 Aspose Pty Ltd. 操作步骤 按表3-5操作 加入物(μl) 血清标本 生理盐水 试剂Ⅰ 混合， 37℃5 min，在波长340nm，生理盐水调零， 读各管吸光度(A1B，A1U) 试剂Ⅱ 混合， 37℃5 min，在波长340nm，生理盐水调零， 读各管吸光度(A2B，A2U) 空白管（B） － 15 250 50 测定管（U） 15 － 250 50 表3-5 免疫透射比浊法测定C反应蛋白操作步骤 Evaluation only. Created with Aspose.Slides for .NET 3.5 Client Profile 5.2.0.0. Copyright 2004-2011 Aspose Pty Ltd. 计算 式中265/315是进行体积校正参数，265为加入试剂Ⅱ前体积，315为加入试剂Ⅱ后体积。 按照试剂配套标准品使用要求，用5个不同水平的标准液，并以生理盐水为空白，经校准测定，仪器自动对标准品响应量通过合适的数学模型如Logit-Log，拟合成校准曲线。校准仪器后，仪器直接报告检测结果。 Evaluation only. Created with Aspose.Slides for .NET 3.5 Client Profile 5.2.0.0. Copyright 2004-2011 Aspose Pty Ltd. 参考范围 新生儿：血清CRP≤0.6mg/L； 出生后l周至l个月婴儿：血清CRP≤1.6mg/L； 孕妇：血清CRP≤47mg/L； 成人和儿童：血清CRP（0.068~8.2）mg/L。 Evaluation only. Created with Aspose.Slides for .NET 3.5 Client Profile 5.2.0.0. Copyright 2004-2011 Aspose Pty Ltd. 临床意义 CRP是机体对炎性刺激或组织损伤发生的急性时相反应时出现的一种急性时相蛋白。 1．各种细菌感染 急性化脓性炎症、肺炎、心内膜炎、尿路感染等，风湿热，传染性单核细胞性增多症等炎症性疾病，血清CRP升高。 2．组织损伤 心肌梗塞、外伤、烧伤等，恶性肿瘤，风湿性疾病，