基因组DNA甲基化的液相色谱质谱分析6-26..docVIP

组织中全基因组DNA甲基化的液相色谱串级质谱分析 张俊杰，蔡春* （广东医学院，湛江，524023） 摘要：建立液相色谱串联质谱测定组织全基因组DNA甲基化水平的方法。采用苯酚氯仿提取组织DNA，88%甲酸裂解，DNA裂解液加入同位素胞嘧啶经N2吹干用甲醇溶解，以液相色谱串联质谱检测胞嘧啶和5-甲基-胞嘧啶含量DNA甲基化水平。结果表明线性范围为1~10ng/mL，相关系数0.9974，相对标准偏差为0.70~4.09%线性范围为1~0ng/mL，相关系数0.9948，相对标准偏差为0.60%~4.81%5-甲基胞嘧啶的检出限为1pg，日内相对标准偏差分别为~ 4.67%，日间相对标准偏差为~ 4.68%，5-甲基胞嘧啶加样回收率为.52%~105.14%。本文建立的方法检测组织中DNA甲基化程度，具有专一性强，操作简便的优点，能较好地满足全基因组DNA甲基化检测的要求。 关键词: DNA甲基化；液相色谱质谱联用；胞嘧啶；5-甲基-胞嘧啶 Analy of Global DNA Methylation in Tissue by Liquid Chromatography Tandem Mass Spectrum ZHANG Jun-jie，ZHANG Li-jian, LIU Chun-an, ZHANG Liang-tao CAI Chun* （Guangdong med