基因转殖技术原理..docVIP

基因轉殖技術原理 I.基因轉殖技術的發展 1974年， Jaenisch 及 Mintz 發現：若將純化的 SV40 DNA 注入老鼠的胚母細胞腔 (blastocoele cavity) 中，在該胚胎發育成鼠之後，可以在老鼠體組織中偵測到注入的 DNA。由此可以推斷：注入的 DNA 可以插入胚胎細胞的染色體組 (genome) 內。? 在1980，由 Gorden et al.將 Herpes Simplex Virus的 thymidine kinase (TK) 基因利用微量注射方式注入培養的纖維細胞 (fibroblast) 之細胞核中，發現約有 5~20% 的細胞含有注入的基因且穩定表現該基因。同年，Gorden et al. 發表了第一篇有關成功地經由微量注射將基因轉殖到老鼠體細胞中的研究報告。此方法將基因構築質體 (genetic construct) 微量注射到老鼠之授精卵中，然後將注射過的卵再送入假孕 (pseudopregnant) 母鼠體內。再確認所生出的小鼠後代是否正確地帶有植入的基因及其表現狀況。? 這些技術被運用在特定的動物上，如：小鼠 、大鼠 、兔子、豬、羊以及牛。基因轉殖技術最主要的目的是發展出新的動物模式 (animal models)。其最著名的例子便是囊性纖維病變 (cystic fibrosis，CF)。?1981年，E