基因重组技术1..docVIP

基因重组技术 工具酶 Cohen and his colleagues completed the first gene recombinant experiment in 1973. Hybrid DNA obtained by gene recombination and transformation in vitro was transformed into E.coli in vitro. Necessary material：endonuclease Ligase Vector host cells Gene cloning （molecular cloning）----通过体外重组技术,将一段目的DNA经切割、连接插入适当载体，并导入受体细胞，扩增形成大量子代分子的过程。基因克隆的核心-----体外重组(Recombination) : 人工将一段目的DNA插入一个载体的过程。 限制酶的特点 （a）识别顺序和酶切位点 识别４-8个相连的核苷酸； 呈回文结构； 对称性； 切点大多数在识别顺序之内，也有例外。 限制酶切后产生两个末端，５’-Ｐ和３’-ＯＨ 相容性末端: 可连接在一起。如：BamHI（ＧＧＡＴＣＣ）与MboI（ＮＧＡＴＣＮ）酶切产生的末端，相连后MboI仍可识别，但BamHI的识别只有十六分之一的可能性。 又如: