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植物遗传育种实验指导书 导读：就爱阅读网友为您分享以下“植物遗传育种实验指导书”的资讯，希望对您有所帮助，感谢您对92的支持! 实验一 根尖细胞有丝分裂涂抹制片法 一、实验目的与要求 学习植物细胞涂抹制片技术；观察有丝分裂过程中染色体行为。 二、实验原理 各种旺盛生长的植物组织，包括：茎尖、根尖、孢原组织等分生组织、愈伤组织及分化的小孢子、萌发的花粉管，经常进行着细胞分裂。经过适当的取材处理，制片后可进行有丝分裂中染色体动态的观察，这是遗传学上通过细胞分裂观察染色体行为、形态结构、数目，从而进行组织分析，鉴别杂种等常用的制片方法。 三、实验材料与设备 实验材料 ：中国水仙、风信子、柴万年青、郁金香(SX)。 用具和试剂 ：镊子、解剖针、盖片、载片、滤纸、单刃刀片 对氯苯饱和溶液、1NHCl、醋酸地衣红、中性树胶，卡诺 固定液。 四、实验步骤 1.予处理：实验前将鳞茎水培，待根长出久1～1.5cm时，剪取0.5cm长的根尖，立即放入对二氯苯饱和水溶液中，在室温下处理2小时左右，予处理的作用主要是浓缩色体，使之分散，同时抑制纺缍丝形成。在制片过程中，如发现染色体后期的分裂相较多时，说明予处理时间不够。 2.固定：倒掉对氯二苯溶液，用水冲洗两遍，用新配的卡诺固定液固定24h后，可放入冰箱中备用。如果要长期保存则要将根尖转入70%的酒精中。 3.解离：先将固定后的根尖用蒸馏水换洗3～4次，再用1NHCl在60℃(注意要严格控制不超过±5℃)的恒温水浴锅中处理10～20min，然后用蒸馏水换洗3～4次。此步主要是使细胞之间分散开，并软化细胞壁，便于压片，同时也利于染色。 4.染色制片 (1)切片：剔除根冠，在生长锥处切下一小块组织。 (2)染色压片：在切下的组织上滴一滴醋酸地衣红，捣碎，除去大块的渣滓，盖上擦干净的盖玻片，覆一层吸水纸，用食指在上面施加少量压力，勿使盖片移动，用解剖针柄轻敲，可使细胞舒展，染色体散开。好的片子放置显微镜下检查，看到有典型的分裂图像时，可把载玻片在酒精灯上往往返烘烤。 5.脱盖片：先在制片上做好记号，以便于封片时按原位复上，在致冷调节器的冷却台上冷冻，用镊子和单刃刀片