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流行性乙型脑炎 流行性乙型脑炎病毒_JEV_全长感染性克隆的制备及恢复病毒的获得_黄莺_图文 导读：就爱阅读网友为您分享以下“流行性乙型脑炎病毒_JEV_全长感染性克隆的制备及恢复病毒的获得_黄莺_图文”的资讯，希望对您有所帮助，感谢您对92的支持! 4期 黄 莺等:流行性乙型脑炎病毒(JEV)全长感染性克隆的制备及恢复病毒的获得 #317# 图4 BHK-21细胞CPE以及间接免疫荧光检测恢复病毒E蛋白(@200) Figure4 IdentificationoftheEproteinofrecoveredvirusbyindirect immunofluoresceneassayandCPEofBHK-21cells 11BHK-21normalcells;21CPEofBHK-21cellsinfected byJEVrecoveredvirus;31IFAresult1 一个值得注意的现象是,在摇菌的过程中出现大量的细菌死亡,收菌时有许多细菌碎片。但是令人吃惊的是,正是提取这些出现细菌死亡的菌液中能够获得没有缺失的重组质粒。而有缺失的重组质粒在摇菌过程中未有异常出现。如果将获得的重组质粒重新转化,摇菌时不再出现细胞死亡的现象。笔者认为,可能是重组质粒经过一个生长的选择压力,在某些位点发生了突变,从而使细菌生存下来,在第二 次摇菌中不再出现细菌的死亡。而那些没有经受选择压力的重组质粒或者出现片段的缺失,或者是引起细菌的死亡。另外,可能如大多数文献报道[4,9]所说,在JEV基因组序列中可能存在潜在的启动子序列,能够使JEV的某些基因表达,产生对细菌生长有害的物质,造成细菌的死亡。关于JEV5c端分子稳定性我们将作进一步的研究。 黄热病毒属病毒在基因组序列上有很高的同源 #318# 病 毒 学 报 19卷 性,所以同属很多病毒在构建全长感染性克隆的过程中都遇到过很多问题。为了得到稳定性高的感染性克隆,不同的实验室都采用了一些优化措施,比如载体方面,采用低、中拷贝数的质粒或者粘粒质粒,人工基因组载体作克隆载体 [6,10,11] 参考文献: [1]TaniguchiT,PalmieriM,WeissmannC.QBDNAcontaininghybrid