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第一章 味精
谷氨酸发酵机制:
谷氨酸的生物合成途径大致是:葡萄糖经EMP途径或HMP途经生成丙酮酸,再氧化成乙酰辅酶A,然后进入TCA,再通过乙醛酸循环、CO2固定作用,生成a-酮戊二酸,a-酮戊二酸在谷氨酸脱氢酶的催化及有NH4+存在的条件下生成谷氨酸。
在微生物的代谢中,谷氨酸比天冬氨酸优先合成。谷氨酸合成过量时,谷氨酸抑制谷氨酸脱氢酶的合成,使代谢转向合成天冬氨酸;天冬氨酸合成过量后,反馈抑制磷酸烯醇丙酮酸羧化酶的活力,停止草酰乙酸的合成。所以,在正常情况下,谷氨酸并不积累。
谷氨酸的大量积累:
代谢调节控制;细胞膜通透性的特异调节;发酵条件的适合
GA生物合成的内在因素
产生菌必须具备以下条件:α—KGA脱氢酶酶活性微弱或丧失(为什么α—KGA是谷氨酸发酵的限制性关键酶?这是菌体生成并积累α—KGA的关键,从上图可以看出,α—KGA是菌体进行TCA循环的中间性产物,很快在α—KGA脱氢酶的作用下氧化脱羧生成琥珀酸辅酶A,在正常的微生物体内他的浓度很低,也就是说,由α—KGA进行还原氨基化生成GA的可能性很少。只有当体内α—KGA脱氢酶活性很低时,TCA循环才能够停止,α—KGA才得以积累。);
GA产生菌体内的NADPH的再氧化能力欠缺或丧失(1、NADPH是α—KGA还原氨基化生成GA必须物质,而且该还原氨基化所需要的NADPH是与柠檬酸氧化脱羧相偶联 的。2、由于NADPH的再氧化能力欠缺或丧失,使得体内的NADPH有一定的积累,NADPH对于抑制α—KGA的脱羧氧化有一定的意义。);
产生菌体内必须有乙醛酸循环(DCA)的关键酶——异柠檬酸裂解酶( 该酶是一种调节酶,或称为别构酶,其活性可以通过某种方式进行调节,通过该酶酶活性的调节来实现DCA循环的封闭,DCA 循环的封闭是实现GA 发酵的首要条件)
菌体有强烈的L—谷氨酸脱氢酶活性(L—谷氨酸脱氢酶,实质上GA产生菌体内该酶的酶活性都很强,该反应的关键是与异柠檬酸脱羧氧化相偶联)
4.GA发酵的外在因素
5.谷氨酸如何积累:
谷氨酸产生菌大多为生物素缺陷型,谷氨酸发酵时通过控制生物素亚适量,使最后一代细菌细胞变形、拉长,改变了细胞膜的通透性,引起代谢失调,使谷氨酸得以积累。谷氨酸高产菌株丧失或仅有微弱的a-酮戊二酸脱氢酶活力,使a-酮戊二酸不能继续氧化;CO2固定反应的能力强,使四碳二羧酸全部是由CO2固定反应提供,而不走乙醛酸循环,以提高对糖的利用率;谷氨酸脱氢酶的活力很强,并丧失谷氨酸对谷氨酸脱氢酶的反馈抑制和反馈阻遏.同时NADPH2再氧化能力弱,这样就使a-酮戊二酸到琥珀酸的过程受阻,在有过量铵离子存在的条件下,a-酮戊二酸经氧化还原共遏氨基化反应而生成谷氨酸,生成的谷氨酸不形成蛋白质,而分泌泄漏于菌体外,谷氨酸产生菌不利用体外的谷氨酸,谷氨酸成为最终产物。
生物素亚适量的原因(2ug/L~5ug/L) :当生物素缺乏时,菌种生长十分缓慢;当生物素过量时,则转为乳酸发酵。
谷氨酸生物合成调节机制(P15-16)
谷氨酸发酵流程:
发酵过程和控制:接种龄和接种量;温度;发酵前期pH值;发酵后期pH值;供氧对谷氨酸发酵的影响与控制;防止噬菌体和杂菌的污染
Glu发酵的四个阶:段适应期;对数生长期;转化期;产酸期。
谷氨酸的提取方式:常用方法:等电点法、离子交换法、锌盐法等。为了提高提取收率,有的工厂还采用等电点—钾盐法,等电点—离子交换提取工艺。新技术:电渗析和反渗透法、浓缩等电点法、离子硅藻土过滤等电点法等。
噬菌体污染的防治P54
谷氨酸制味精工艺流程
中和液除铁:硫化钠法;树脂除铁(铁离子的来源:原辅材料、设备腐蚀等
铁的存在形式;Fe2+、 Fe3+)
谷氨酸中和液的脱色:色素的来源:淀粉制糖、培养基灭菌、发酵液浓缩等。
用透光率的高低衡量。 脱色方法:活性炭脱色、树脂脱色
谷氨酸中和液的浓缩与结晶:
中和液的浓缩:溶液到晶体生成过程1形成过饱和溶液2晶核形成3晶体成长
浓缩方法:常压蒸发、减压蒸发。
起晶方法:1自然起晶 2刺激起晶 3晶种起晶
影响结晶速度的因素1过饱和系数2液膜的厚度3温度与真空度4夹层压力
5稠度6料液质量7晶种质量
味精的结晶工艺技术条件:操作过程1.浓缩2.起晶3.整晶4.育晶5.养晶
味精的分离和干燥方法
分离:三足式离心机
干燥:箱式烘房、真空箱式干燥、气流干燥、传送带式干燥、震动床式干燥
粉末味精为什么加盐:P86(99%的味精,不加食盐。95%、90%、80%等规格的均添加一定量的食盐。)
味精生产中异常现象及其处理
1)味粉混沌:味粉溶解后出现混沌现象,透光率下降。
(1)产生原因 ①硫化钠过量 ②消泡剂过量 ③含有DL-谷氨酸钠 ④原材料质量差
(2)解决措施
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