I动物细胞工程复习资料.docVIP

动物细胞工程思考题 1.动物细胞工程的基本概念和主要研究内容 细胞工程:是通过对细胞及组分的人工程序操作,研究生命活动的规律,实现对动物的遗传改造,结合非生物材料的手段,生产用于治疗人类疾病或缺陷的人工器官,组织,细胞及代谢产物或用于深入研究的材料等为主要研究内容的一门学科. Cell Engineering has been defined: By manipulating cell or cell parts, as study of life science phenomenon, genetic improvement of animals, making things with and from cells, often combining these with non-living components, to produce devices useful to mankind in the treatment of disease and defect or in the further progress of science. 主要研究内容: 1转基因动物(Trangenetic animals) 2试管婴儿(Test-Tube baby) 3性别控制(Sex control) 4人工器官(Artificial organ) 5生物材料(Bio-material) 6动物克隆(Animal Cloning) 2人造细胞概念及技术 人造细胞是运用人造材料组成最小限度的细胞，目前为止，大多数的尝试基本只能制造一个能发挥多种细胞功能的（转录 翻译产生ATP等）的体系，而并不能完全发挥细胞所有功能。 制造：将能够生产蛋白的生物分子混合悬浮于油中，用双层磷脂分子将生物分子混合物颗粒包裹在其中。细胞膜用蛋清中的脂肪分子制成，内部细胞器取自诸如大肠杆菌之类的生物。科学家还向其加入控制合成蛋白α-溶血素的基因，α-溶血素能够插入细胞膜形成小孔，环境中的营养物质便可以通过这些小孔进入人造细胞。 3.显微镜由来 17世纪初，Galileo Galilei通过两个玻璃透镜形成一个圆柱体工具，观察到了昆虫的眼睛，并绘制几何图，成为第一个通过原始显微镜记录生物学观察的学者。 1655年 Robert Hooke(虎克)：利用自己制作的简易复合式显微镜观察软木塞时，发现蜂窝状小室，实际上是软木死细胞。他将其命名为cellulac，这就是细胞一词的由来。Robert Hooke的发现为以后的细胞学说打下基础。 1674到1683年，Antony Van Leauwenhoek用自制所谓高倍显微镜发现了肉眼难见的细菌。之后两世纪没有人看到比细菌更小的细胞。 4.相差显微镜,荧光显微镜,透射电子显微镜,扫描电子显微镜的特点和用途 1相差显微镜:细胞各结构的密度不同,通过致密部分的光线速度小,与通过邻近部分的光线产生相位偏差或光程差.这种差异是人眼不可分辨出来的.显微镜利用光的自觉衍射和干涉特性,把经过不同区域的光线的光位移差转化为振幅差,使细胞各结构之间呈清晰明暗对比可见. 特点及用途: 可以观察活细胞; 可以在镜下连续拍摄(可用来观察细胞迁移活动,分裂等过程.) 2荧光显微镜:利用强烈的经过滤光器的激发光线,激发标本产生荧光. 特点及用途: 染色简便 标本呈彩色图案,明亮 灵敏度较高(可用来观察某些分子在细胞中的动态等) 3透射电子显微镜(TEM):使用的电磁透镜,由精密线圈产生磁场,使用的照明工具是电子束,而光镜使用的是玻璃透镜,光源是可见光,TEM需要超薄切片(50-100nm),将一个细胞分成100-200块. 特点及用途: 透射观察,可观察到二维结构. 可以观察到细胞内部的超微结构,局部结构 不可以用于观察活细胞.(结合负染色,冷冻断裂,冷冻蚀刻等技术可观察某些细胞器的精细结构,以及胞质中细胞骨架纤维及其结合蛋白.) 4扫描电子显微镜(SEM):电子束经光镜聚焦成极细的电子探针,在样品表面逐线扫描样品,被电子激发产生二次电子,经收集,转换,放在荧光屏上成像. 特点及用途: 用于观察细胞及内部的表面结构. 立体感强,三维结构 分辨力(2nm)不及透射电镜(0.1nm)高,用于单个细胞或细小的生物样品. (详见细胞生物学说,微生物学教材) 5什么时候用显微镜的相差，荧光功能？ 相差显微镜具有两个其他显微镜所不具有的功能:①将直射的光(视野中背景光)与经物体衍射的光分开;②将大约一半的波长从相位中除去，使之不能发生相互作用，从而引起强度的变化。 这种显微镜最大的特点是可以观察未经染色的标本和活细胞。也可以在镜下连续拍摄(可用