植物培养资料..doc

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植物培养资料.

植物组织培养:指在无菌条件下,将离体的植物器官、组织、细胞或原生质体,培养在人工配制的培养基上,人为控制培养条件,使其生长、分化、增殖,发育成完整植株或生产次生代谢物质的过程和技术。也称为离体培养。 外植体:凡是用于离体培养的细胞、组织或器官统称为外植体。 组织培养六要素: 无菌条件 外植体 人工培养基 人工条件:温度、光强、光照时间 细胞全能性:增殖、分化、发育成完整植株 培养容器:能进行气体交换 培养材料类型: 1. 组织培养:指以分离出植物各部位的组织(如分生组织、形成层、薄壁组织等)或已诱导的愈伤组织为外植体的离体无菌培养,是狭义的组织培养。 2. 器官培养:植物的六大器官的无菌培养 3. 胚胎培养:幼胚、成熟胚、胚乳、胚珠、子房的无菌培养 4. 细胞培养:指对单个细胞或较小细胞团的离体无菌培养,获得单细胞无性繁殖系。 5. 原生质体培养:指以除去细胞壁的细胞(原生质体)为外植体的离体无菌培养。 6. 其他:次生代谢物生产、脱毒培养、人工种子等。 按照培养过程分为:初代培养和继代培养 按照培养基类型分为:液体培养和固体培养 按照培养目的分:愈伤组织培养、分化培养和生根培养 主要研究任务: 细胞、组织、器官等在离体培养下的: 营养条件、激素、培养条件 形态发生 脱毒方法与机理 再生植株的遗传稳定性 种质资源离体保存的机理与方法 细胞离体融合机理与方法 细胞全能性:指植物体的任何一个有完整细胞核的活细胞都具有该种植物的全套遗传信息和发育成完整植株的能力。 植物细胞的全能性是潜在的,要实现植物细胞的全能性,必须具备一定的条件: 1.细胞与植株分离,脱离植株的控制; 2.创造适合于细胞生长和分化的培养基和培养条件; 3.要有成功的再生体系,即获得再生植株。 植株再生的过程即为植物细胞全能性表达的过程,一般经过脱分化和再分化两个阶段。 细胞分化:指细胞在分裂过程中发生结构和功能上的改变,逐渐失去分裂能力,而形成各类植物组织和器官。由种子萌发到长成完整植株,这是胚性细胞不断分裂和分化的结果。 细胞分化形成不同的器官和组织,即细胞分化导致形态发生 组织培养的形态发生有两种途径:一种是器官发生另一种是体细胞胚胎发生 脱分化的难易程度与植物的种类、组织和细胞的状态有关。 一般单子叶植物比双子叶植物难;成熟的植物细胞和组织比未成熟的植物细胞和组织难;单倍体细胞比二倍体细胞难。 再分化:指离体的植物细胞或组织经脱分化培养后再次进行分化,形成新的细胞、组织、器官的过程。 再分化有两种方式:一种是器官发生,一种是胚胎发生 形态建成 (愈伤组织到再生植株) 先芽后根,这是最普遍的发生方式; 先根后芽,但芽的分化难度比较大; 在愈伤组织块的不同部位上分化出根或芽,再通过维管组织的联系形成完整植株。 通过在愈伤组织表面或内部形成胚状体,是愈伤组织形态发生的特殊方式。 影响组培苗遗传稳定性的因素 1.基因型 2.继代次数与继代时间 3.形态发生:以茎尖、茎段发生不定芽,变异率低 以花器官诱导的植株,变异率高 胚状体发生途径,变异率低 愈伤组织悬浮培养分化不定芽,变异率较高 4.外源激素:激素影响细胞有丝分裂,高浓度激素作用下,细胞分裂和生长激素加快,不正常分裂频率增高,再生植株变异增多。 减少变异,提高遗传稳定性的措施 (1)选取具有分生点的茎尖或幼嫩的器官为外植体 (2)缩短继代时间,减少继代次数 (3)采用胚状体发生方式 (4)采用适当的激素种类和浓度 (5)减少或不使用容易引起诱变的化学物质 植物离体快速繁殖特点:繁殖系数大,周年生产,繁殖速度快,苗木整齐,可工厂化生产。 次生代谢物:植物组织培养能产生很多种药物,主要有苷类、生物碱、固醇类、醌类、黄酮类、蛋白质及其它生理活性物质。 植物组织培养: (1)是指分离单个或多个细胞或植物体的一部分,在人工配制的培养基上进行培养,使之长成一株完整植物体的过程。按照外植体的不同,组织培养可分为植株培养、胚胎培养、器官培养、细胞培养和原生质体培养。 (2)理论依据---细胞全能性 (3)培养条件可以人为控制;生长周期短,繁殖率高;管理方便,利于工厂化生产的突出特点,因而发展迅速。 (4)农业生产上的应用主要体现于以下几个方面:快速繁殖优良苗木;获得脱毒苗;育种上应用;工厂化育苗。 细胞分化:指细胞在分裂过程中发生结构和功能上的改变,而形成各类植物组织和器官。 脱分化:也称去分化,一个已停止分裂的成熟细胞转变为分生状态并形成未分化的愈伤组织的现象叫脱分化。 脱分化的机理:脱分化诱导期间会导致细胞膜透性改变,细胞核增大,内质网范围扩大,多核糖体形成,过氧化物酶增加,蛋白质和酚类物质合成活跃等。 影响脱分化的主要因素: (1

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