第四章-培养基及原料处理分析.pptVIP

根据来源分： 根据主要成分或使用目的分： 天然培养基 合成培养基 半合成培养基 基础培养基 加富培养基 鉴别培养基 选择培养基 培养基分类 3.根据物理状态不同分为： 固体培养基主要应用：实验室菌种分离、纯化、鉴别、保藏；天然固体基质培养基制成固体培养基，用在各种固体发酵上；由血清或硅胶配制成特殊培养基，用于培养专门微生物；滤膜培养基用于实验室分离计数。 液体培养基：菌种扩大培养代谢。 半固体培养基：实验室微生物运动性观察。 固体培养基 液体培养基 半固体培养基 4. 根据用途分： 孢子培养基——供制备孢子用； 种子培养基——满足菌种生长； 发酵培养基——满足大生产中大量菌体生长和繁殖以及代谢产物积累。除含有菌体生长所必须的营养物外，还要有产物所需的特定元素、前体物质和促进剂等。 孢子培养基 要求：能使菌体生长快，产生孢子数量大、质量好，且不会引起菌种变异。 特点 C、N源不宜多，否则只长菌丝，少长或不长孢子； 无机盐浓度要适当控制，否则会影响孢子的颜色和孢子量。 种子培养基 要求 营养丰富、完全，氮和维生素的含量高些； 培养基中加入一些易于吸收利用的快C、N源，便于孢子发芽生长，保证球形； pH要稳定； 最后一级尽可能接近发酵培养基，常加入少量发酵合成期才大量需要的物质。 发酵培养基 目的：使接种菌丝生长并能高效表达，获得高的发酵产量，同时组分尽可能单一，以保证高的得率。 要求 营养丰富完全，有利于产物合成； 不能大量加入快C、快N源，应和慢C、N源相结合； 在产物分泌期间，pH 稳定； 加入适量合成所需的物质，如前体等，进行定向发酵； 采用中间补料，以提高发酵单位； 原料的考虑——成本问题 谷氨酸发酵种子培养基和发酵培养基配方 培养基成分 种子培养基 发酵培养基 淀粉水解糖(%) 2.5 12.5 玉米浆(% 2.5-3.5 0.5-0.8 K2HPO4(%) 0.15 0.15 MgSO4(%) 0.04 0.06 尿素 0.4 3 Fe2+,Mn2+ 各2ppm 各2ppm 不同的发酵产物，不同的菌种所选择的发酵培养基是不同的。 白酒 (chinese spirit)发酵：固体发酵培养基； 果酒(fruit spirit)发酵：果汁 ； 啤酒(beer) 发酵：麦芽汁液体培养基； 酒精(alcohol)发酵：淀粉糖化醪 ； 氨基酸(amino acid)发酵：水解糖液加其他营养成分； 柠檬酸(citric acid)发酵：淀粉液化醪 ； 乳酸(lactic acid)发酵：淀粉糖化醪； 甲烷(methane)发酵：复杂的有机废物发酵； 抗生素(antibiotic)发酵：淀粉糖化醪 +豆饼粉+麸皮粉 上节知识回顾 培养基的分类： 孢子培养基、种子培养基、发酵培养基 培养基的组成： 前体 第三节 工业发酵中营养基质的选择 1、营养基质的组成的选择： 营养基质种类：了解菌种菌种名称、营养、生活史、生长环境、生理生化特性、选料、用量、产品、工艺、设备等。 营养基质原材料质量问题：南北差异、季节差异等。 营养基质选择经济原则：培养基要考虑其经济性和科学性即来源广泛、价廉适于生长、繁殖、产物积累、不同阶段有不同的基本培养基。 2、培养基成分用量： 参照微生物细胞内元素的比例确定 参照碳氮比：培养基碳源中碳原子摩尔数与氮源中氮原子摩尔数之比。 其他因素：如维生素、生长因子、促进剂、抑制剂、PH等。 第四节 工业发酵中营养机制的配制方法 （一）培养基成分选择的原则 1、培养基确定方法 (1)、做好调查研究工作 (2)、对生产菌种要了解 (3)、做好预实验 (4)、先作单因子试验，后作多因子试验 (5)、注意中间补料控制 (6)、根据生产和科学研究的需要选择培养基 (7)、根据经济效益选择培养基原料 2、培养基成分选择的原则 （1）菌体的同化能力 即一些微生物由于不能分泌一些水解酶而无法利用某些大分子物质，而只能利用小分子物质。尤其碳源、氮源选择时要注意。 尤其碳源、氮源选择时要注意。 以酿酒酵母为例：一般不含淀粉酶，不能利用（不）可溶性淀粉；细胞内缺乏将硝酸根离子还原为铵离子的所需催化酶，所以做培养基优化时，我们用氮源时考虑各种氨盐等而少考虑各种硝酸盐类。 2、代谢的阻遏和诱导 碳氮源要注意速效和迟效的相互搭配。 （1）C源 葡萄糖：分解代谢物会组遏或抑制某些产物合成所需的酶系的形成或酶的活性 诱导酶制剂生产：易利用的碳源（葡萄糖、果糖）不利于产酶；难利用碳源（淀粉、糊精）对产酶有利。 （2）N源 微生物利用N源的