第九章食品的卫生细菌学检验.pptVIP

MPN法简介The Most Probable Number Method 1g/ml检样中最近似值(MPN)表 以1、0.1、0.01、各用3管。 阳性管数 MPN 个/100 g/ml 1g/ml×3 0.1g/ml×3 0.01g/ml×3 0 0 0 ＜30　　 0 0 1 30 0 0 2 60 0 0 3 90 0 1 0 30 0 1 1 60 0 1 2 90 0 1 3 120 0 2 0 60 0 2 1 90 0 2 2 120 0 2 3 150 0 3 0 90 0 3 1 130 0 3 2 160 0 3 3 190 五、粪大肠菌群的检验 粪大肠菌群：系一群需氧及兼性厌氧，在44.5℃培养24h内能发酵乳糖产酸产气和分解色氨酸产生靛基质的革兰氏阴性无芽胞杆菌。 检验方法 检样 产酸产气 查MPN表报告 EMB 分离靛质基试验 阳性反应 方法一： 45 ℃EC肉汤发酵 稀释 44℃乳糖胆盐发酵 方法二： 检样 稀释 36℃乳糖胆盐发酵 产酸产气 产酸产气 EMB 分离 查MPN表报告 1、从制备样品匀液至稀释完毕,全过程不得超过15min。 2、对产酸但未看到气泡的乳糖发酵，用手轻打动试管，如有气泡沿管壁上浮，应考虑可能有气体产生，应作进一步试验。 3、挑选菌落进行证实试验时，最少要挑2个以上的典型菌落或非典型菌落进行接种。 4、不可用其他胆盐代替指定的胆盐。 六、检验注意事项 EMB平板照片及原理 靛基质试验原理及照片 七、大肠菌群快速检验 食品大肠菌群快速检验方法： TTC显色法； DC试管法； 纸片法。 （一）食品饮料大肠菌群快速检验纸片 ?????使用方法： 1.样品稀释同国标法 2.接种： 饮料和饮用水采用原液、1:10、 1:100三个稀释度，固体食品采用1:1 、1:10和1:100三个稀释度。用1亳升灭菌吸管吸取1亳升同一稀释度的稀释液均匀涂布到袋中的纸片上，做三个重复。 3.培养： 将接种好的纸片轻轻压平（可叠放），在36℃下培养15－24h观察结果。 4.结果判定: 纸片上出现紫红色斑点,其周围有黄圈者,为阳性. 纸片为一种着色,无菌落生长者为阴性. 纸片呈紫兰色,有紫红色斑点，其周围地黄圈者阴性. 酸性食品接种后,纸片变黄,经培养后无紫红色斑点为阴性 （二）餐具大肠菌群快速检验(纸片法) 使 用 方 法 ： 1. 采样6—10份。 碗、盘、杯等每份贴纸片两张，用无菌生理盐水湿润纸片后，立即贴于食具内侧表面，30秒后取下，置于原塑料袋内。筷子以5只为一份样品，用吸管吸取生理盐水湿润纸片后，立即将筷子进口端（约5cm）抹拭两张，放入原塑料袋内。 2.将已采样的纸样置于37°C培养15小时. 纸片在黄色背景上出现红色斑点为阳性，纸片在紫兰色背景上呈现红色斑点，但周围没有黄晕均为大肠菌群阴性。同一份样品两张纸片均是阴性为合格。 食品冷饮大肠菌群检验纸片冷饮、乳制品和调味品等大肠菌群的测定 食品饮料大肠菌群快速检验纸片饮料、食用纯水和糕点的大肠菌群测定 餐具大肠菌快速检验纸片餐具卫生消毒效果检测 大肠菌群测试片适用于需要对大肠菌群准确计数的样品，如消毒牛乳、冷饮和调味品等。 八、水的大肠菌群检验 大肠菌群MPN/100mL 细菌总数 CFU/mL 生活饮用水 ≤ 3 /L ＜100 瓶装饮用纯净水 ≤ 3 ≤ 20 饮用天然矿泉水罐装产品 0 ＜50 地面水质量标准 ＜10000个/L 准备加氯消毒后供饮用的水 ≤ 1000 准备加氯消毒后供饮用的水 ≤ 10000 游泳池水 ≤ 100 ＜1000 （一）、水样的采集 1、自来水（未含氯）：龙头火烧灭菌，畅流5—10′后取样。 2、地面水源水：江湖河，水库，水池等。浸入水下20cm下取样。水井50cm下取样。 3、漂白粉处理的水样：自来水，游泳池水，应在瓶内加入0.03g硫代硫酸钠/500ml，或2ml 1.5%硫代硫酸钠液/500ml，除氯。 4、运送：2小时内送到检验室。6—10℃，6h,立即检验. 5、检验前：将水样振摇5—10分钟。 （二）、生活饮用水或食品生产用水的检验（大肠菌群 ） 各加10ml 各加100ml 水样 初发酵 三料乳糖胆盐50毫升装 三料乳糖胆盐5毫升装 EMB分离 36℃培养 24h 复发酵 乳糖发酵 镜检 36℃培养 24h 大肠菌群检索表（饮用水） 100ml阳性管数 10ml阳性管数 0 1 2 每L水中大肠菌群数 0 ＜3 4 11 1 3 8 18 2 7 13 27 3 11 18 38 4 14 24 52 5 18 30 70 6 22 36 92 7 27 43 120 8