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系统性红斑狼疮患者抗中性粒细胞胞浆抗体的检测系统性红斑狼疮患者抗中性粒细胞胞浆抗体的检测中华皮肤科杂志 1999年第4期第32卷 短篇论著作者：孟庆功　袁国华单位：100853北京,解放军总医院风湿科抗中性粒细胞胞浆抗体(ANCA)是针对中性粒细胞和单核细胞胞浆蛋白的自身抗体。该抗体被普遍认为是系统性血管炎的标记抗体。间接免疫荧光法(IIF)检测ANCA有3种荧光图谱,胞浆型(c-ANCA)、核周型(p-ANCA)和非典型型(a-ANCA)。为探讨ANCA与系统性红斑狼疮(SLE)的关系及其临床意义,我们采用IIF法对63例SLE患者血清进行检测。一、材料与方法1.对象:SLE患者63例,为本科住院患者,年龄12～62岁,平均30岁,病程1个月至25年,平均3.8年。所有患者均符合美国风湿病协会1982年的诊断标准。另选择42例正常健康人作为对照。2.ANCA检测:从正常献血员抗凝血中分离出中性粒细胞,用细胞离心涂片机制备抗原片,1000r/min离心4min,无水乙醇4℃固定5min,吹干。标本血清用0.01mol/LPBS1∶10稀释加在抗原片上,37℃孵育30min,PBS洗3次,每次5min,吹干。加1滴羊抗人IgG荧光抗体(军事医学科学院提供,用时1∶40稀释)于抗原片上,同上37℃孵育30min,PBS洗3次,吹干。加缓冲甘油封片,荧光显微镜下观察结果。中性粒细胞胞浆出现特异性荧光者为c-ANCA,细胞核周围出现特异性荧光者为p-ANCA,不典型荧光着色者为a-ANCA,胞浆及核周围均无特异荧光染色者为阴性。每例标本均进行2次以上检测证实。3.抗核抗体(ANA)检测:以小鼠肝切片为底物,采用IIF。抗dsDNA抗体采用放射免疫分析法检测。抗ENA抗体采用对流免疫电泳法检测。4.统计学处理:采用χ2检验。二、结果1.42份正常健康人血清均为阴性,63例SLE患者血清26例ANCA阳性(41.3％),其中p-ANCA15例,a-ANCA11例。2.在ANCA阳性组,浆膜炎及多系统受累的SLE患者明显高于阴性组,而肝损害、肺部病变、皮损及心电图异常在两组之间没有差异(见表1)。抗dsDNA抗体阳性及中度以上贫血(血红蛋白＜90g/L)的SLE患者在ANCA阳性组明显高于阴性组(见表2)。表1　ANCA与SLE临床表现的关系临床表现ANCA阳性(26例)ANCA阴性(37例)χ2值P值蝶形红斑13(50.0)16(43.2)0.281＞0.05盘状红斑及紫癜19(73.1)25(67.6)0.220＞0.05口腔溃疡11(42.3)17(45.9)0.082＞0.05腹水4(15.4)5(13.5)0.044＞0.05浆膜炎13(50.0)6(16.2)8.274＜0.01心电图异常6(23.1)14(37.8)1.534＞0.05肺部病变4(15.4)5(13.5)0.044＞0.05肝脏损害6(23.1)3(8.1)2.794＞0.05多系统受累14(53.8)9(24.3)5.741＜0.05表2　ANCA与SLE其它实验室检查的关系实验室检查ANCA阳性(26例)ANCA阴性(37例)χ2值P值24h蛋白尿＞0.15g/L22(84.6)30(81.1)0.132＞0.05血小板＜100×109/L5(19.2)8(21.6)0.053＞0.05白细胞＜4.0×109/L10(38.5)15(40.5)0.028＞0.05血红蛋白＜110g/L21(80.8)22(59.5)3.200＞0.05＜90g/L12(46.2)8(21.6)4.241＜0.05血沉＞20mm/lh22(84.6)31(83.8)0.008＞0.05ANA阳性26(100)33(89.2)3.000＞0.05坑ds-DNA抗体阳性10/108/17(47.1)7.941＜0.01抗Sm/抗阳性5(19.2)11(29.7)0.888＞0.05抗SSA/抗SSB阳性10(38.5)20(54.1)1.488＞0.05三、讨论deBandt等在11例SLE患者血清中检测出1例p-ANCA,4例a-ANCA。Lawton和Lee在46例SLE患者中检测出14例p-ANCA。而我们在63例SLE患者中发现15例p-ANCA,11例a-ANCA。在SLE患者血清中未见有c-ANCA的报道。这些不同的荧光图型是由多种抗原成分所致。c-ANCA的主要抗原成分为蛋白酶3(PR3),p-ANCA的主要抗原成分为髓过氧化物酶(MPO),a-ANCA的抗原成分目前尚不清楚。Afelera等的研究发现,抗中性粒细胞胞浆抗原和核抗原的免疫应答不同,本文结果也未发现ANA与ANCA有相关性。研究认为,ANCA能刺激活性氧离子(ROS)的释放,引起组织损伤。对比ANC