2013整理终版版植物细胞工程实验指导.docVIP

植物细胞工程 实验一 常用玻璃仪器的清洗与干燥 姓名： 学号： 一、实验目的 熟悉实验室规则和玻璃器皿的领用要求，熟悉常见玻璃器皿及其用途，掌握常用玻璃器皿的洗涤、干燥及保存方法。 二、实验原理 植物细胞工程实验室经常使用的玻璃仪器和瓷器，必须要保证清洁，才能使实验得到准确的结果，学会清洗玻璃仪器，是进行实验重要的环节。 洗涤仪器的方法很多，应根据实验的要求，仪器类型、污物的性质和沾污的程度来选择。一般来说洗涤方法有刷洗或水洗、去污粉或肥皂洗、酸洗、洗液洗涤等。 用上述方法洗涤后，还要用自来水冲洗，但自来水中含有钙、镁、氯等离子实验中不允许这些杂质存在，应该再用少量的蒸馏润洗三次，以便把它们洗去。 洗净的仪器壁上不应附着不溶物、油污，这样的仪器可被水完全湿润。把仪器倒转水即顺器壁流下，器壁上只留下一层既薄又均匀的水膜，不挂水珠，这表示仪器已经洗净。 干燥的方法有烘干、烤干、风干、吹干、有机溶剂干燥等，应根据器材类型不同进行选择。 三、实验用具 玻璃仪器，烘箱、酒精灯、电吹风机；K2Cr2O7、H2SO4（浓）等；去污粉、肥皂、试管刷、试管架等。 四、实验过程 1、首先，根据实验需要选择实验仪器，列出物品领用清单 名称 规格 数量 名称 规格 数量 按照实验仪器清单，领取玻璃仪器一套。领取仪器时应仔细清点，如发现不符合规格、数量以及有破损仪器时应在洗涤前及时调换。 2. 配制洗液 如：K2Cr2O7-H2SO4洗涤液 称取重铬酸钾（粗）10g置于 400 毫升烧杯内，加入 20mL水，加热使之溶解。等冷却后，在不断搅拌下徐徐注入 175mL粗浓硫酸即成。配好的洗液应为深褐色,储于细口瓶中备用。经多次使用后洗涤效率降低时，可加入适量的KMnO4粉末即可再生。用时防止它被水稀释。 3.对已领取的玻璃仪器分类，选择合适的方法进行清洗。 （1）新的玻璃器皿应用 2%的盐酸溶液浸泡数小时，用水充分洗干净。 （2）烧杯、锥形瓶等——用毛刷蘸去污粉或合成洗涤剂刷洗——自来水洗净——蒸馏水润洗 (本着“少量、多次”的原则) 3次 （3）量筒、量杯可注入洗涤剂（合成洗涤剂或洗衣粉溶液），稍稍用力振荡或用毛刷刷洗，再用自来水冲洗至无泡沫，容量瓶、滴定管、移液管沥干水后，注入少量铬酸洗液，浸泡4-6小时或过夜，倒出洗液（倒回洗液瓶内回收或倒入用废洗液缸内统一处理），用自来水冲洗干净（不能用铬酸洗液洗涤含有乙醚的仪器，乙醚遇到洗液易发生爆炸）；最后用蒸馏水顺内外壁冲洗2—3次即可。 （4）滴定管、移液管、吸量管、容量瓶等，有精确刻度——用0.2%～0.5%的合成洗涤液或铬酸洗液浸泡几分钟（铬酸洗液收回）——自来水洗净——蒸馏水润洗3次 已洗净的仪器不能再用布或纸抹，因为布和纸的纤维会留在器壁上弄脏仪器。 4.将清洗干净的玻璃仪器依不同要求，采用不同方法（自然凉干，烘干，烤干，吹干等）进行干燥。 洗净的仪器，可以放在恒温箱内烘干（60～80度至干燥，蒸发皿可105～120度）。放置仪器时应注意使仪器的口朝下，不能倒置的仪器则应单放，应该在恒温箱的最下层，放一瓷盆，承受从仪器滴下的水珠，以免损坏电炉丝。 带有刻度的计量仪器，不能用加热的方法进行干燥，以免影响其精密度。 对于急于干燥的仪器或不适于放入烘箱的较大的仪器可用吹干的办法。通常用少量乙醇、丙酮（或最后再用乙醚）倒入已控去水分的仪器中摇洗，然后用电吹风机吹，开始用冷风吹1~2分钟，当大部分溶剂挥发后吹入热风至完全干燥，再用冷风吹去残余蒸汽，不使其又冷凝在容器内。 不急等用的仪器，可在蒸馏水冲洗后在无尘处倒置处控去水分，然后自然干燥。可用安有木钉的架子或带有透气孔的玻璃柜放置仪器。 5.将清洗，干燥过的玻璃仪器按指定位置（仪器橱、架等）存放好。 仪器在使用前、实验完毕、贮存超过规定时限后，均应进行洗涤。实验二 MS培养基母液的配制 姓名： 学号： 一、实验目的 通过MS培养基母液的配制与保存，掌握配制与保存MS培养基母液的基本技能。 二、实验原理 培养基是植物细胞、组织和器官吸取营养的场所。在植物细胞的分裂和分化过程中，需要各种营养物质，这些营养物质包括无机营养成分、有机营养成分、植物生长调节物质等。在对植物的器官、组织和细胞进行离体培养时，只是切取植物体的一小部分，它们无法象整体植株那样合成生长发育所需的全部物质。而自然界的植物千差万别，每一种植物都有自己独特的生理代谢过程和各自的营养需求，没有哪一种培养基能够适用于所有植物。因此，对培养基组成成分的筛选是非常重要和必不可少的程序。 MS培养基含有近30种营养成分，为了避免每次配制培养基都要对这几十种成分进行称量，可将培养基