園林植物快速繁殖技术知识要点.docxVIP

园艺植物离体培养学的基本含义植物离体培养指通过无菌操作，使植物体的各类结构材料（外植体）接种于人工配制的培养基上，在人工控制的环境条件下，进行离体培养的一套技术与方法，通常称之为植物组织培养式植物的细胞与组织培养。离体培养技术体系胚胎培养及以胚胎为基础的培养技术器官及器官原基培养组织培养细胞培养原生质培养及以原生质体为基础的培养技术离体培养的应用多种的繁育与脱毒种质资源的贮存细胞次生代谢物质的生产细胞工程和基因工程的生物技术育种遗传学和生物学基础的研究园艺植物离体培养学的形成与发展（一）、植物离体培养的渊源及其早期的实践?????? 1902年、haberlandt提出了细胞全能性的观点，并首次进行植物细胞培养实验。（二）、植物离体培养基本技术体系的形成?????? 1934年white首次建立了番茄的无性繁殖系?????? 1937年white发现b族微生物素和吲保乙酸对离体培养的作用?????? 1934—1939年white等人初步建立起植物离体培养的基本方法?????? 1943年white发表了第一部植物离体培养专著《植物组织培养手册》又重新提出了细胞全能性。?????? 1957年skaog建立了器官分化的激素配比模式。?????? 1953年muir报道了细胞悬浮培养法。（三） 园林植物离体培养学科的建立??? 1、完善离体培养技术、探索理论基础??????? 1964—1966年诱杀未成熟花粉形成单位体植株。??????? 1960年分离番茄动根原生质体获得成功，??????? 1978年首先获得了体细胞杂种——“potamato”.??????? 植物细胞全能性为基因转化提供方便。2、开拓应用研究?? 生产上应用最广泛，最成功的领域是离体快速繁殖。植物离体培养学与园艺科学的关系（一）、离体培养与园艺植物良种繁育学（二）、离体培养与园艺植物育种学（三）、离体培养与园艺植物基础学科??????????? 第一章? 离体培养的基本操作方法?? 通过学习，理解和掌握离体培养的基本操作方法包括：一般的材料选取、无菌技术、培养基配置和环境条件调控为园林植物快繁技术打下基础。外植体的选择与处理外植体植物离体培养中的各种接种材料，包括植物体各个器官、组织、细胞和原生质体等。外植体的选择选择优良的种质主要的园艺植物选取性优良的种质先特殊的基因型?要有明确目的???????????????? 具有一定的代表性选择建壮的植株生长建壮的无病虫害的植株?正常的器官和组织?多年生植物应从成年树上取材选择外植体的大小对植体太大易污染???????? 太小多形成愈伤组织?外植体大小在0.5——1.0cm。选取对植体的时期一般按照植物生长的最适时期取材含酚类物特多的植物，应在酚类物含量低的季节取材从种苗圃推算苗期，增殖代数等因数，确定选取外植体的合适时期。选择细胞[培养材料通常根据细胞培养的目的 选择细胞培养材料多数采用茎类分生组织和胚胎培养的愈伤组织作为细胞培养的起始材料。为了生产次生代谢产物，则选取某次生物质含量高的特定器官或组织。??????? （二）、培养材料的处理????????????? 1、母株的预处理???????????????? 促使母株的生长带谢活跃???????????????? 方便取材????? 容易灭菌??? 降低污染率???????????? 2、外植体休眠期的处理??????????????? 通常采用低温或者赤霉药剂进行处理 ，???????????? 3、外植体的灭菌???????????????? 进行严格的灭菌?? 林料来源?? 取材部位?? 取材季节?????????? ????????????????第 二节? 培养茎的制备?培养茎的种类及组成培养茎外植体生长的营养物质，通常有两个水平，一是基本培养茎包括大量元素和微量元素，维生素和氨基酸，还有糖和水。二是完全培养茎，即在基本培养的基础上，根据各种不同实验要求，附加一些物质，如各种植物生长调节剂以及其它的复杂有机附加物，外植体生长的营养物质。???? 基本培养茎???? 大量元素+微量元素+维生素+氨基酸+糖+水完全培养茎基本培养茎+植物生长调节剂（有机附加物）固体培养茎和液体培养茎的比较固体培养茎设备简单? 使用方便? 充分利用培养容器中的养分易选成自我毒害液体培养茎需要一定的设备??? 有利于外植株的生长避免上述固体培养茎的缺点常见培养茎配方 （参见教材附录2）配制培养茎的准备工作?（一）、器皿和用具的准备??????? 主要器具：烧杯、容量瓶、移液管、滴管、试管器具的准备： 清洁???????? 烘干（二）、水和药品?????? 水原则上用纯水，一般用蒸馏水即可?????? 化学药品用分析，纯或化学纯（三）、贮备液的配制???? 1.贮备液的