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毛细管电泳三种前沿应用的简介 摘 要：CE 作为一种经典电泳技术与现代微柱分离有机结合的新兴分离技术，近年来发展迅猛并得到广泛应用。而其与电化学发光及与质谱的联用，还有NACE的兴起更是拓宽了它的使用范畴，弥补了CE的一些缺陷。 关键词：毛细管电泳，无水毛细管电泳，电化学发光，质谱 毛细管电泳，亦称高效毛细管电泳，是以高压电场为驱动力，以毛细管作为分离通道，依据样品中各组分之间淌度和分配行为的差异而实现分离的一类液相分离技术[1]。 CE作为一种经典电泳技术与现代微柱分离有机结合的新兴分离技术，自上世纪80年代问世以来，得到了迅速的发展，其研究和应用涉及环境分析、药物分离、生化分析等几乎所有的分析领域，引起学术届，尤其是色谱界的广泛关注。这与它独特的优点是密不可分的: ①高效（105TP/m-107TP/m）、快速（几十秒至几于分钟）；②分离模式多,选择自由度大；③分析对象广,小到无机离子大至整个细胞,具有“万能”的分析功能和潜力；④操作可高度自动化；⑤样品与试剂消耗量小、运转费用低,无环境污染问题等等[2]。本文将对毛细管电泳在与电化学发光及质谱方面的联用进行介绍，并对近年新兴的无水毛细管技术做一论述。 1．毛细管电泳—电化学发光分离检测技术 1．1电化学发光及CE-ECL简介[3] 电化学发光(ECL)是一种在电场的作用下，在电极表面将电能转化为辐射能的化学发光方法。在ECL体系中，三联吡啶钌(Ru(bpy)32+)是最常用的发光试剂。近几年，Ru(bpy)32+ 技术已经成功应用于CE，简称CE-ECL。CE-ECL主要用来检测胺类化合物，并且成功用于各种实际样品的分析。它具有以下的优点：操作简单、灵敏度高、分离效率高、分析速度快以及试剂消耗少等。 1．2 CE-ECL的模式[3] CE-ECL主要有四种模式：管区带电泳-ECL(CZE-ECL)，胶束电动色谱-ECL(MEKC-ECL)，毛细管电色谱-ECL(CEC-ECL)以及非水毛细管电泳-ECL(NACE-ECL)。其中CZE-ECL最简单，也最常见。 1．3 CE-ECL 技术的应用进展 1．3. 1 CE-ECL技术在药物分析方面的应用 CE-ECL技术在药物分析方面的应用进展迅速。有实验[4]采用毛细管区带电泳吡啶钌电化学发光技术分析了药物中的比索洛尔；也有实验[4]将SDS加入CE-ECL体系, 成功实现了去甲肾上腺素、脱氧肾上腺素和异丙去甲肾上腺素的分离检测。毛细管电泳与电化学发光淬灭效应的间接检测也被用于酚类物质的研究。 1．3. 2 CE-ECL技术对中药分析的应用[4] CE-ECL技术被应用于对中药苦参中喹诺里西啶生物碱的分析及植物提取液中山莨菪碱、东莨菪碱和阿托品的分析等。 1．3. 3 CE-ECL技术在生物体液及其生化方面的应用[4] CE-ECL技术可用于喹诺酮类药物、阿莫西林的分析,也可用于尿液中药物的检测。 1．4 小结 CE-ECL联用技术以及该技术在分析化学、生物分析化学等领域的应用取得了重要的进展。它可用于对具有化学发光响应的药物制剂及药物在生物体内的代谢物进行分析, 为药物的分析提供灵敏的检测手段。今后对该技术的研究工作可能会围绕以下几方面展开[4]: (1)共反应剂与吡啶钌电化学发光共反应机理研究。对共反应机理的进一步研究,有利于提高电化学发光的选择性和灵敏度,同时拓展该技术的应用范围。(2)新的电化学发光共反应剂的研究开发；(3)CE-ECL技术新应用。CE-ECL技术在众多领域的应用所带来的潜在价值, 已引起了人们的广泛关注；(4)高通量CE-ECL分析体系的研究与开发。 2．毛细管电泳-质谱联用技术 2．1 CE-MS技术简介 自1987年首次提出CE-MS联用方法以来, CE-MS作为具有高分离效率和高灵敏度的方法, 其应用受到了广泛关注, 并在过去的20年得到了迅速发展。CE的一些常用分离模式, 如毛细管区带电泳(CZE)、胶束电动色谱(MEKC)、毛细管电色谱(CEC)等,都在CE-MS中得到了应用。CE-MS联用分为在线联用和离线联用两种方式。CE-MS离线联用的关键是对已分离样品的有效收集;而且与离线联用相比, CE-MS在线联用具有样品损失少、自动化程度高、分析速度快等优点,其应用要比离线联用广泛得多。 2．2 CE-MS接口技术的研究进展 接口技术是实现CE-MS联用的关键所在。近几年来,关于CE-MS方法学的研究主要是关于新接口技术。该技术的研究使得CE-MS的联用更加方便, 效率更高。 2．2．1 CE-ESI-MS接口技术
ESI方法的发现使得被分析物带上多电荷后采用质谱仪可以检测相对分子质量达几万甚至十几万的生物大分子。由于ESI自身的优势以及LC-ESI-MS接口技术的日益趋于成