植物逆境生理第八章植物热激反应及其信号转导途径描述.pptVIP

和寡聚域的主要结构是保守的，其它区域只是在亲缘关系相近的HSF中才表现出同源性。 DNA结合域(DNA-binding domain，DBD)是HSF分子中最保守的一个区域，由大约95个氨基酸组成，位于HSF的N端。该区域属于a+?类的螺旋-转角-螺旋蛋白。空间构型是由3个a螺旋形成的螺旋2转角2螺旋区域和一个4条反向平行的?折叠片层区域构成的一个致密的球形结构。在第3和第4?折叠之间形成了一个柔性的暴露在溶剂中的环。植物的HSF缺乏这个环状结构。位于C-端的?片层第4链是由一些非常保守的氨基酸残基组成，对HSF三聚体中DBD的定向有明显的作用，并有助于HSF与HSE的高度亲和。另外，已知螺旋3在与DNA结合时起识别作用。 寡聚域(oligomerization domain，OD)是由2个疏水7肽重复区域A和B (HR-A/B)组成。它的功能是允许HSF形成同源三聚体构型。目前一些学者认为，OD的功能是由3股a -螺旋通过卷曲螺旋型a-螺旋(a -helical coiled coil)结构使HSF形成同源三聚体形式。 在HSF的C-端存在另一个疏水7肽重复(C-terminal heptad repeats，HR-C)。这个区域与非热激条件下HSF三聚化的抑制有关。HR-C突变可导致一种组成型的HSF三聚化和DNA结合活性。HR-C在动物HSF中非常保守，而在植物和酵母中不保守。在正常生长条件下，HR-A/B和C之间通过分子内的卷曲螺旋型a-螺旋相互作用，抑制HSF三聚体的形成。 HSF携带两簇基本氨基酸序列，后者被认为起核定位信号( nuclear localization signal，NLS)的功能。一簇高度保守的氨基酸位于DBD的C-端(N端NLS)，另一簇位于HR-A/ B的C-端(C-端NLS)。在以转基因烟草原生质体为材料进行的HSF功能研究中发现，番茄2种HSF N端的NLS与核转位无关，而C-端NLS对HSF的核转位更为重要。脊椎动物HSF的核转位需要两端的或只需要N端的NLS。HSF核转位是胁迫调节HSF活性的一个环节。 高等真核生物HSF的激活域(activator domain，AD)位于HSF分子的C-端。该区域氨基酸序列不很保守。人类和果蝇HSF的AD显示了 有限的序列同一性，并富含酸性氨基酸，疏水性较强。番茄HSF的AD氨基酸序列分析表明，芳香族的、大的疏水性和酸性氨基酸残基可能在转录激活中起作用。番茄HSF的缺失分析表明，AD对转录激活具有重要作用。在3种番茄HSF中存在1至2个拷贝的色氨酸重复基元(Trpmotif)，认为它们起转录激活子(transcriptional activator)基元的作用，定位于一个富含负电荷的区域。在大豆GmHSF 29和GmHSF 34中，存在单一拷贝的Trp基元，而在GmHSF和GmHSF1中不存在Trp基元。大豆HSF中Trp基元的重要性还没有确定。 （三）热激基因表达的调控 热激基因表达的调节主要是在转录水平上进行的。热激基因的转录需要HSF来介导。因此，HSF活性的调节是热激基因表达转录调节的中心机制。真核生物中，与胁迫时HSP表达相关的HSF1编码基因呈组成型表达，热激时激活已存在的HSF1库。热激基因表达的转录调节主要包括HSF的三聚化、HSF的核转位、HSF的磷酸化、HSP自身对HSF的反馈调节等几方面。 HSF三聚化是HSF激活的必要条件。HSF有无活性的单体和具有DNA结合活性的同源三聚体两种存在形式。热激以前，HSF处于钝化的单体状态，热激时，HSF发生从单体到三体的转变。 HSF的三体形式对HSE 有高度的亲和性，可结合到HSE上，激活热激基因的转录。然而，热激后恢复时，HSF三聚体又发生解聚，重新回到钝化的单体状态(图8-1) 。 图 8-1 热激因子结构及三聚化（李冰等，2002） HSF转位是胁迫激活HSF活性的一个环节。用HeLa细胞所做的研究表明，在无胁迫时，HSF1分散在细胞质和细胞核中，热胁迫时，HSF1主要分布于细胞核中。热激时可观察到HSF1在30 s内迅速转移到核中并形成大的不规则的核颗粒(HSF1胁迫颗粒)，这种颗粒在3 min内的大小、数目和荧光强度保持稳定。热激恢复时，HSF1胁迫颗粒消散，分散于核质中。HSF1的这种转位是迅速且可逆的。HSF1胁迫颗粒可能作为一种核单位对HSF1活性起时间调节和空间组织作用。植物方面与HeLa细胞的研究结果一致，番茄的2种HSF在无胁迫时分散存在于细胞质和细胞核中，热激时主要存在于细胞核中，而热激后恢复时相当一部分HSF又返回到细胞质中。 HSF活性也通过HSF的磷酸化来调节。最初的