现代测试技术凝胶渗透色谱GPC选编.ppt

凝胶渗透色谱 -GPC（Gel Permeation Chromatography） 色谱法 　色谱法（又称层析法），是一种物理的分离方法。 色谱法总有两个相，一个固定相和一个流动相，因为流动相的流动以及各成分在两相中的性质的差别而得到分离。 色谱法的来源 色谱法最早是1903年由俄国植物学家茨维特分离植物色素时采用。 他在研究植物叶的色素成分时，将植物叶子的萃取物倒入填有碳酸钙的直立玻璃管内，然后加入石油醚使其自由流下，色素中各组分互相分离形成各种不同颜色的谱带。此方法因此得名为色谱法。 色谱法的分类 一). 按分离原理分　　吸附色谱法 分配色谱法 离子交换色谱法 排阻色谱法 二）按分离方法分 柱色谱法 薄层色谱法 纸色谱法 气相色谱法 液相色谱法 主要内容 一、GPC定义及原理 二、 GPC仪器配置及流程 三、样品制备 四、数据处理 五、应用 一、GPC定义 GPC是利用多孔凝胶固定相的独特性质，产生的一种主要依据分子尺寸大小的差异来进行分离的方法。 GPC属于体积排除（阻）色谱法（SEC,Size Exclusion Chromatography）的一种 聚合物分子量的特点 1.分子量大 2.多分散性 3.分子量统计平均值+分布系数才能确切描述聚合物分子量 GPC分离机理 二、GPC仪器的基本配置 溶剂贮存器(Solvent) 泵(Pump) 进样系统(Autosample ) 色谱柱(column) 检测器(detector) 数据采集与处理系统(Data Acquirement and Process System) 废液池 (Waste) 仪器基本配置流程图 泵(515 HPLC Pump) 要求精度很高 进样器 手动进样器（manual syringe injection） 自动进样器（Automatic sample） Waters717 AutoSample 检 测 器 示差检测器（最常用） 粘度检测器、光散射检测器 多波长紫外检测器、示差+紫外检测器 Waters2410 Differential Refractometer 示差检测器的原理 聚合物溶液的折光指数为： n=c1n1 + c2n2 c1、 c2——分别为溶剂和溶质的物质的量浓度； n1、 n2——分别为溶剂和溶质的折光指数。 因为 c1 + c2 =1 折光指数差：? n = n-n1 =c2 (n2-n1 ) 示差检测器的色谱图 Waters996 PDA Detector 二极管阵列紫外检测器 PDA三维谱图 抽取单一波长的PDA谱图 色谱柱 根据凝胶种类分类： 有机相：交联PS、交联聚乙酸乙烯酯、交联硅胶 水 相：交联葡聚糖、交联聚丙烯酰胺 色谱采集及分析系统(Millennium32) 流动相（溶剂） 用作流动相的溶剂必须使聚合物链打开成最放松的状态；溶液粘度低； 流动相与色谱柱中的凝胶固定相相互匹配，能浸润凝胶，防止凝胶的吸附作用； 流动相应与检测器匹配； 流动相不能腐蚀仪器部件，影响仪器使用寿命； 三、样品制备 干燥 样品必须经过完全干燥，除掉水分、溶剂及其它杂质。 溶解时间 充分溶解 分子质量越大，所需要的溶解时间越长。 操作要求 为了增加样品的溶解，可以轻微扰动样品溶液 浓 度 溶液浓度根据分子质量大小在0.05 ～ 0.3(wt)%之间做适当调节 分子质量相对大的样品浓度低些，分子质量相对小的样品浓度稍微高些。 过滤 聚合物溶液必须经过0.45um的过滤膜过滤； 可以使用在线过滤器(高温条件下使用) 四、数据处理 1、建立校正曲线 2、根据公式计算相对分子质量及相对分子质量分布 3、普适校正 校正曲线的建立 由一系列已知分子量的窄分布标样（一般多于10个）配置成聚合物溶液，流经色谱柱，记录标样的出峰时间。 标准样品的选择要分布在比较宽的范围。 1、校正曲线的建立 标准样品的GPC谱图 标准样品的GPC谱图 校正曲线 2、聚合物分子量及分子量分布计算方法 数均分子量 重均分子量 Z均分子量 分子量分布 4、普适校正 理论上要求被测聚合物与标样具有相同的化学组成、化学结构及组装结构。实际这很难作到，因此需要进行普适校正。 普适校正原理 根据Einstein公式 〔n〕=2.5NAVh/M 〔n 〕 M= 2