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生物化學实验实验报告
基础生物化学实验论文
——马铃薯的成分分析
课程名称:基础生物化学实验
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摘要
根据在基础生物化学实验的六堂课上,根据介绍相关的技术与方法对土豆成分的含量进行了分析与研究,主要研究其蛋白质含量、还原糖含量与VC含量,运用相应的数据统计方法,结合相关的文献资料进行整理,对进行初步的品质分析马铃薯,又称地蛋、土豆?、洋山芋属多年生草本植物,块茎可供食用,是全球第三大重要的粮食作物,仅次于小麦和玉米。与小麦、玉米、稻谷、高粱并成为世界五大作物。
马铃薯原产于南美洲安第斯山区,人工栽培历史最早可追溯到大约公元前8000年到5000年的秘鲁南部地区。
马铃薯主要生产国有中国、俄罗斯、印度、乌克兰、美国等。中国是世界马铃薯总产最多的国家。
2015年,中国将启动马铃薯主粮化战略,推进把马铃薯加工成馒头、面条、米粉等主食,马铃薯将成稻米、小麦?、玉米外的又一主粮。2005年11月,在联合国粮食及农业组织大会上,秘鲁常驻代表提出一项寻求将世界关注重重点转移到马铃薯对粮食安全以及增强发展中国家对于马铃薯种植的重要性的提议, 此提议在当年获得通过,联合国宣布认定2008年为国际马铃薯年。在2010年,马铃薯的世界产量已经达到了3亿2418万1889吨,中华人民共和国是世界第一产量大国,将近7500万吨。中国马铃薯的主产区是西南山区、西北、内蒙古和东北地区。其中以西南山区的播种面积最大,约占全国总面积的三分之一。黑龙江省是中国最大的马铃薯种植基地。?
(1)取新鲜的黄瓜约2g加入少量2%草酸溶液,50ml容量瓶中,2%草酸溶液稀释至刻度线, 研磨液 v1初=0.065ml v1末=0.799ml 对照组 v3初=0.799ml v3末=1.189ml w=12.643 第二次 研磨液 v2初=0.02ml v2末=0.40ml 对照组 v4初=0.40ml v4末=0.54ml w=8.82
三、实验分析
1、维生素c的作用
维生素C 具有增强免疫力,预防感冒等疾病;促进胶原蛋白的形成,使皮肤光滑、美白、有弹性;具有抗氧化、解毒的作用,减少烟、酒、药物副作用、环境污染对身体的损害等作用。而人体不能制造维生素C,必须每天从富含维生素C的食物中摄取来满足身体需要。维生素C在人体内只能停留4个小时,所以每天必须至少补充两次,同时由于一支香烟可破坏25mg的维生素C,长期吸烟的人更需要服用维生素C。
优点:方法简便、快速,器材方便——无需电器,计算方便——无需标准曲线等。缺点:滴定终点难以确定,样品中如果存在色素(如番茄等红色材料)则会干扰对终点的判断,操作必须迅速否则误差较大等。突出的一点是滴定终点难以确定。利用2.6一二氯酚靛酚滴定含有抗坏血酸的酸性物质溶液而当抗坏血酸尚未被全部被氧化时,滴下的2.6一二氮酚靛酚立即被还原成无色。而溶液中的坑坏血酸一旦被氧化,则滴入的2.6一二氮酚靛酚则立即使溶液呈现红色。所以,当溶液从无色转变成微红色时,即表示溶液中的抗坏血酸刚刚 被全部氧化,此时为滴定终点。此种方法对于无色或淡黄色、绿色样品液的滴定终点易确定,而对于山植、大枣、草葺、酸枣等紫色、粉红或褐色等色泽的朵蔬样品液的滴定终点就难以观察确定。为此,往往经稀释,添加活性炭、白陶土来进行脱色处理,添加维生素C的方法来解决。
1.2.1 考马斯亮蓝G-250法测定蛋白质取2g左右,研磨,转移至离心管中,冲洗三次研钵,收集于离心管中,放置半小时后以充分提取然后以4000r/min离心10min,弃沉淀取上清液转入10ml容量瓶中,并稀释至刻度摇匀备用。
(2)吸取0.1ml加入5ml考马斯亮蓝G-250蛋白试剂充分混合放置后用1cm光径比色杯在595nm下比色,记录光密度OD
(3)对比标准曲线计算数据方法简单,只需一种显色液。反应迅速,只需一步反应,显色可在 5 min 之内完成。干扰少,许多被认为对 Lorwy 法有干扰的物质(如糖、缓冲液、还原剂和络合剂)不影响该方法。尽管该方法有如此多的优点,但在实际应用中也有其缺点,如线性关系不很好,因此使用该方法测定蛋白质浓度时应特别注意。1. 由于各种蛋白质中的精氨酸和芳香族氨基酸的含量不同,因此 Bradford 法用于不同蛋白质时有较大的偏差。在制作曲线时通常选用G-球蛋白为标准蛋白质,以减少这方面的偏差。2.仍然有一些物质干扰此法的测定。主要干扰物质有:去污剂Triton X-100,SDS和0.1mol/L的NaOH3.标准曲线也有轻微的非线性,因而不能用Beer定 律进行计算,而只能用标准曲线来测定蛋白质的浓度。1.2.3
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