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* 百合(2n=24)材料的减数分裂细线期、偶线期、粗线期、双线期和终变期 * 上: 二分体和四分体 * 左图: 水稻(2n= 24)花粉母细胞的减数分裂 1.粗线期; 2.终变期; 3.中期I; 4.后期I; 5.末期I; 6. 分裂间期; 7.前期II; 8.中期II; 9.后期II; 10.末期II; 11.四分体; 12.单核花粉; 13.单核分裂花粉; 14. 二核花粉; 15.成熟花粉粒 右图: 普通小麦(2n= 42)花粉母细胞的减数分裂 1.细线期; 2.偶线期; 3.晚粗线期; 4.晚双线期; 5.终变期; 6.中期I; 7.后期I; 8.末期I; 9.分裂间期; 10.前期II; 11.中期II; 12.后期II; 13.末期II; 14.四分体 * 小花2-3个→冲洗→吸干→剥离花药→1d染液→挤出花粉母细胞→去除残余组织→染色5?8min→低倍镜检→加盖片→加热→吸水纸→压片→镜检 * 取材时间的早晚是实验成功与否的关键步骤之一,必须适时取材 * 实验七 减数分裂花粉母细胞制片及观察 一、实验目的 1. 学习和掌握细胞减数分裂CS标本的制片技术和方法 2. 熟悉减数分裂的全过程及各个时期CS的动态变化和形态特征 二、实验原理 减数分裂: 特殊的真核细胞分裂 ?连续两次核分裂—MⅠ MⅡ ?前期Ⅰ变化复杂;同源CS联会、片段互换 ?后期Ⅰ同源CS分离,数目减半 以动、植物雄性生殖分裂较为方便.在适当的时机采集花蕾(花序)或精巢,经适当技术处理,可在显微镜下观察细胞的减数分裂过程 百合减数分裂前期的五个时期 减数分裂模式图 三、实验材料、器具、药品试剂 大葱(Allium fistulosum, 2n=16)幼嫩花序 显微镜,载片,盖片,镊子,解剖针,吸水纸,铅笔,酒精灯等 卡诺固定液, 45％乙酸; 0.5％醋酸洋红,95％、70％乙醇 四、实验步骤 1. 取材 制片成败的关键因素 ?大葱: 伞形花序,顶生,两性花;春季花序嫩绿饱满、总苞光滑 ?蚕豆、玉米、百合、蝗虫 2. 固定 卡诺固定液: 12-24h 95％-80％-70％梯度乙醇依次漂洗5-30min 70％乙醇保存,4℃ 3. 剥取花药 摘取2-3个小花,置吸水纸上除去保存液(可用蒸馏水冲洗后再吸干,尤其是采用醋酸洋红染色法一定要将乙醇洗净) 解剖出的花药置洁净载玻片上;镊子挤出花粉母细胞,小范围内涂成薄层 4. 染色与压片 加一滴染液(不宜多),稍后将所有可见花药壁残渣清除干净 加盖片,吸去多余染液,拇指垂直紧压,使CS散开分布于同一平面 勿使盖片发生搓动,以免破坏细胞与CS的完整性 5. 镜检 低倍下区分各时期的花粉母细胞、二/四分体以及花粉粒、药壁组织 高倍下观察,鉴别各分裂时期的CS形态结构、数目及行为变化 药壁组织: 小,着色较深 中期I 后期I 末期I 前期II 四分孢子 花粉粒 制片的简要步骤 小花2-3个→冲洗→吸干→剥离花药→1d染液→挤出花粉母细胞→去除残余组织→染色5min→加盖片→吸水纸→压片→镜检 注意事项 注意区分性母细胞及小孢子形成过程中各时期细胞的特点,并与花药壁细胞进行区分: 药壁细胞 减数分裂的各时期细胞 细胞形态 方形 圆形(一个性母细胞分裂形成的子细胞保持在一起) 细胞大小差异 较小 较大(差异十分显著) 染色程度 较深 较浅 五、作业 1. 制作能观察到较多分裂相,且各时期图象清晰的制片1-2张. 2.绘制你所观察到的减数分裂典型时期细胞、CS图象,并简要说明CS的行为特征. 3. 分析制片过程中出现的问题及可能原因. 4. 减数分裂意义何在?为什么说它是三大遗传规律的细胞学基础? 人有了知识，就会具备各种分析能力， 明辨是非的能力。 所以我们要勤恳读书，广泛阅读， 古人说“书中自有黄金屋。 ”通过阅读科技书籍，我们能丰富知识， 培养逻辑思维能力； 通过阅读文学作品，我们能提高文学鉴赏水平， 培养文学情趣； 通过阅读报刊，我们能增长见识，扩大自己的知识面。 有许多书籍还能培养我们的道德情操， 给我们巨大的精神力量， 鼓舞我们前进。 * 减数分裂是配子形成过程中一种特殊形式的有丝分裂,其中CS结构呈周期性变化,并在特定时期呈现稳定的形态特征,也是进行CS形态、结构与数目鉴定的有利时期; 包括两次连续的细胞分裂—MI和MII;每次分裂都可分为紧密衔接的前、中、后、末四个时期,前期I变化最为复杂,又分为细线、偶线、粗线、双线和终变期.减数分裂所形成的雌、雄配子,其CS数目只有体细胞的一半; 减数分裂过程中发生同源CS配对、非姊妹染色单体片段交换、同源CS分离等一系列独特行为,为远缘杂种的分析及三大遗传定律的论证等遗传研究提供了直接或间接的证据. * 麝香百合(Lilium longiflorum,