第十五色谱分析法导论.ppt

* * 2. 纵向扩散项 B / u （分子扩散项） 纵向分子扩散是由浓度梯度造成的。组分从柱入口加入，其浓度分布的构型呈“塞子”状。它随着流动相向前推进，由于存在浓度梯度，“塞子”必然自发的向前和向后扩散，造成谱带展宽。分子扩散项系数为 B = 2γ Dm 式中： γ——弯曲因子，填充柱 γ 空心柱γ = 1 Dm——组分在流动相中的扩散系数 γ是填充柱内流动相扩散路径弯曲的因素，也称弯曲因子，它反映了固定相颗粒的几何形状对自由分子扩散的阻碍情况。 Dm为组分在流动相中扩散系数（cm3·s-1）,分子扩散项与组分在流动相中扩散系数Dm成正比. * Dm与流动相及组分性质有关： (a) 相对分子质量大的组分Dm小，Dm反比于流动相相对分子质量的平方根，所以采用相对分子质量较大的流动相，可使B项降低。 (b) Dm随柱温增高而增加，但反比于柱压。 另外纵向扩散与组分在色谱柱内停留时间有关，流动相流速小，组分停留时间长，纵向扩散就大。因此为降低纵向扩散影响，要加大流动相速度。对于液相色谱，组分在流动相中纵向扩散可以忽略。 * 3. 传质阻力项 Cu 由于气相色谱以气体为流动相，液相色谱以液体为流动相，它们的传质过程不完全相同。 （1）气液色谱 传质阻力系数C包括气相(固定相)传质阻力系数Cg(流动相)和液相传质阻力系数C1两项，即 C = Cm+ Cs 气相传质过程是指试样组分从气相移动到固定相表面的过程。这一过程中试样组分将在两相间进行质量交换，即进行浓度分配。有的分子还来不及进入两相界面，就被气相带走；有的则进入两相界面又来不及返回气相。这样使得试样在两相界面上不能瞬间达到分配平衡，引起滞后现象，从而使色谱峰变宽。 * 对于填充柱，气相传质阻力系数Cm为： 式中k为容量因子。由上式看出，气相传质阻力与填充物粒度dp的平方成正比，与组分在载气流中的扩散系数Dm成反比。因此，采用粒度小的填充物和相对分子质量小的气体（如氢气）做载气，可使Cm减小，提高柱效。 * 液相传质过程是指试样组分从固定相的气/液界面移动到液相内部，并发生质量交换，达到分配平衡，然后又返回气/液界面的传质过程。这个过程也需要一定的时间，此时，气相中组分的其它分子仍随载气不断向柱口运动，于是造成峰形扩张。 由上式看出，固定相的液膜厚度df薄，组分在液相的扩散系数Ds大，则液相传质阻力就小。降低固定液的含量，可以降低液膜厚度，但k值随之变小，又会使Cs增大。 * 4.载气流速u对理论塔板数高度H的影响 u Hmin upot H-u曲线 * 分子扩散项和传质阻力项对板高的贡献 较低线速时，分子扩散项B/u起主要作用；应采用分子质量较大的载气，使组分在气相中有较小的扩散系数。 较高线速时，传质阻力Cu项起主要作用；其中流动相传质阻力项对板高的贡献几乎是一个定值。宜采用低分子质量的载气(H2, He)，以减小气相传质阻力，提高效能。 * 根据速率理论，将上面各式总结，即可得气液色谱速率板高方程，即著名的van Deemter方程，亦称速率方程。对色谱分离条件的选择有指导意义。 它指出了色谱柱填充的均匀程度，填料颗粒的大小，流动相的种类及流速，固定相的液膜厚度等对柱效的影响。 * 三、分离度 要实现色谱的分离：首先两峰之间的距离要大，即两组分的保留时间有足够大的差值，其次峰形要陡。 * 分离度R是一个综合性指标。 分离度是既能反映柱效率又能反映选择性的指标，称总分离效能指标。分离度又叫分辨率，它定义为相邻两组分色谱峰保留值之差与两组分色谱峰底宽总和之半的比值，即 R = 2 (tR2 - tR1) / W1 +W2 R值越大，表明相邻两组分分离越好。一般说，当R1时，两峰有部分重叠；当R=1时，分离程度可达98%；当R=1.5时，分离程度可达99.7%。 通常用R=1.5作为相邻两组分已完全分离的标志 * 当色谱峰峰形不对称或相邻两峰间有重叠时，峰宽较难测量，可用半峰宽代替峰宽 R = (tR2 - tR1) / （W1/2,1 +W1/2,2） 将柱效、选择性及分离度联系起来，假设两相邻峰峰宽相等(W1=W2),得到柱效、选择性及分离度之间的关系式： * 色谱分离基本方程式 通过上式可从色谱图计算R，当没有体现处γ2，