灭菌效果检测解析.ppt

一.高温对培养基的影响？ 影响 形成沉淀物（如有机多肽类和无机物碳酸盐、磷酸盐沉淀等） 破坏营养，提高色泽（如：氨基糖、焦糖褐变） 改变培养基 PH(可使PH下降） 降低培养基浓度 发生美拉德反应而降低营养 美拉德反应 美拉德反应是胺、氨基酸、蛋白质与糖类、醛类、酮类之间的反应。糖、醛、酮类自身也有可能发生褐变，当其与氨基酸、蛋白质共存时，更有促进褐变的作用。 2.预防措施 特殊加热灭菌法(如：微波炉灭菌、连消法灭菌等） 过滤除菌法（如：膜过滤、石棉板过滤、硅藻土过滤等） 迅速降温（目的：有效降低营养成分的流失。一般降低温度:60min内降到60℃以下或更低) 其他方法：按配方逐一加入 二.如何检查灭菌效果？ 培养基灭菌效果检查1 试管母种培养基灭菌→从高压蒸汽灭菌锅不同位置随机抽取5支→放置恒温培养箱（26-30 ℃ 5-7 d)培养 →若无杂菌出现，则灭菌彻底。 培养基灭菌效果检查2 种子和发酵液体培养基灭菌→从灭菌锅各层分别取样（每层对角线随机取样5瓶 ，恒温培养箱 28-30 ℃ 5-7d ) ) →检查有无霉菌菌落 →（ 进行细菌检查）将抽取的样品无菌取出少量接入细菌培养基) →37 ℃条件培养24h →若无细菌菌落，则灭菌彻底 接种室灭菌效果检查 (1)平皿法 (2)试管法 1）平皿法 制作常规的霉菌培养基（如:牛血清白蛋白）→灭菌→常规制作平板→随机取几组无菌平皿培养基（每组3-5个平皿） →在接种室台面不同位置打开平皿，其中一组不打开作为对照→开盖平皿放置5min然后盖盖→与对照组同时在30 ℃培养72h →检查是否有霉菌菌落，若实验组少于1个菌落则合格 细菌检查与此相同 2）试管法 取制作好的真菌与细菌常规培养基斜面各3-5支为一组→放置接种室内→按无菌操作打开实验组棉塞30min →塞好无菌棉塞→与对照组同时放在30 ℃和37 ℃培养→细菌培养24-28h,霉菌72h观察→若实验组均不长任何菌落，则接种室灭菌良好 * * 1培养基灭菌效果检查 2接种室灭菌效果检查 *