13章需氧革兰阳性杆菌（检验）幻灯片.pptVIP

第13章 需氧革兰阳性杆菌 芽胞杆菌属——炭疽芽胞杆菌、蜡样芽胞杆菌 李斯特菌属——产单核李斯特菌 丹毒丝菌属——红斑丹毒丝菌 加特纳菌属——阴道加特纳菌 第一节 炭疽芽胞杆菌 引起动物和人类炭疽病 是人类历史上第一个被发现的病原菌，俗称炭疽杆菌 一、临床意义 1.致病物质 荚膜 抗吞噬，有利于细菌在组织内繁殖扩散 炭疽毒素 保护性抗原、致死因子、水肿因子 二、生物学特性 ㈠形态与染色 致病菌中最大的G+粗大杆菌，两端平切、排列呈竹节状 有毒株有荚膜 芽胞在有氧条件下形成，呈椭圆形，小于菌体，位于菌体中央 无鞭毛? ? ㈡培养特性 需氧 营养要求不高 在普通培养基中生长旺盛 菌落直径2mm～4mm 灰白色、无光泽、不透明、扁平、边缘不整齐的粗糙型 在低倍镜下观察菌落边缘呈“卷发状” 在液体培养基中呈絮状沉淀生长 明胶培养管—37℃18～24h表面液化成漏斗状，由于细菌沿穿刺线向四周扩散形成“倒松树状”。 ㈢抗原性 细菌性抗原 菌体多糖抗原 荚膜多肽抗原 芽胞抗原 炭疽毒素 保护性抗原 致死因子 水肿因子 ㈣抵抗力很强 耐高温 干燥土壤、皮毛中存活数年至几十年 对碘和氧化剂敏感 对青霉素等敏感 三、微生物学检验 ㈠检验程序 见图13-2 ㈡标本的采集与处理 皮肤炭疽：病灶深部标本/分泌物 肺炭疽：痰、血液 肠炭疽：粪便、呕吐物 脑血炭疽：脑脊液、血液 其它：内脏、耳、舌尖、淋巴结、污染物等 ㈢标本直接检查 1、直接镜检 2、荚膜荧光抗体染色 荧光显微镜 3、核酸检测 PCR、核酸杂交 ㈣分离培养与鉴定 1、分离培养 血琼脂平板 普通琼脂平板 2、鉴定 ⑴形态学特征 ⑵生化反应 见表13-1 ⑶噬菌体裂解试验 ⑷串珠试验 青霉素串珠试验：炭疽杆菌在含微量（0.05～0.5U/ml）青霉素的培养基上， 37℃ 6h，细胞壁合成受阻，细胞膜受胞质压力膨出，其形态变异为大而均匀的圆球形，呈串珠状排列。 类炭疽无此现象 ⑸青霉素抑制试验 炭疽芽胞杆菌一般在含5U/ml的青霉素平板上仍能生长，在含10、100U/ml青霉素的平板上受到抑制而不生长。 ⑹串珠和青霉素抑制联合试验 ⑺荚膜肿胀试验等 荚膜肿胀试验 1 ） 待测菌 待测菌 2）炭疽荚膜抗血清 兔血清 3） 1%亚甲蓝 1%亚甲蓝 4）加盖玻片，湿盒，室温5~10min 5）镜检：蓝色细菌周围可见厚薄不等、边界清晰的环状物为阳性 一、临床意义 主要引起食物中毒 以夏秋季最为多见 引起的食物中毒有两型：腹泻型和呕吐型 二、生物学特性 1、形态染色 革兰阳性大杆菌，两端较钝圆 多呈链状排列 可形成芽胞 引起食物中毒的菌株多为周毛菌 不形成荚膜 2、培养特性 营养要求不高 形成较大、灰白色、粗糙似毛玻璃状或白蜡状的菌落 在血琼脂平板上呈β溶血 三、微生物学检验 ㈠检验程序 见图13-5 ㈡标本采集 排泄物、呕吐物和可疑食物 ㈢标本直接镜检 ㈣分离培养与鉴定 1、活菌计数 涂布法 倾注平板法 细菌数大于105个/克或大于105个/毫升，即有 发生食物中毒的可能 2、分离培养 普通琼脂平板 血琼脂平板 3、鉴定 依据形态、染色、菌落特点、生化反应、血 清学试验等 ㈤药敏试验 第四节 阴道加特纳菌 一、临床意义 在正常妇女阴道内也可检出 可引起细菌性阴道病 也能引起新生儿败血症和软组织感染 二、生物学特性 革兰染色性视菌株和菌龄不同而异 易呈多形性 营养要求较高 形成圆形、光滑、不透明，针尖大小的菌落 三、微生物学检验 1、检验程序 见图13-8 2、标本采集 阴道分泌物 3、标本直接检查 湿片镜检、染色镜检、pH测定、胺试验 4、分离培养与鉴定 5、药敏试验 第三节 产单核细胞李斯特菌和红斑丹毒丝菌 一、产单核细胞李斯特菌 1、临床意义 传染源：健康带菌者 传播途径：粪-口途径、胎盘、产道、直接接触 致病物质：溶血素、菌体表面成分 引起疾病：传染性单核细胞增多症、脑膜炎、菌血症、食物中毒 2、生物学特性 革兰阳性短小杆菌，成双排列，有鞭毛 营养要求不高，菌落小，呈灰白色 耐盐、耐碱，对酸、热、消毒剂敏感 3、微生物学检验 检验程序 见图13-6 标本采集 血液、脑脊液、分泌物、咽喉拭子、羊水和动物内脏等 直接镜检 分离培养与鉴定 药敏试验 检验结果分析与报告 二、红斑丹毒丝菌（俗称丹毒杆菌） 1、临床意义 是猪和其他动物的致病菌，人接触感染动物或皮革而感染。主要感染疾病为类丹毒（是一种急性的但进展缓慢的皮肤疾病），常发部位：手部。 有时可引起关节炎、急性败血症、心内膜炎和食物中毒。 2、生物学特性 革兰阳