第3章 污染物的生物效应检测2009（参考）.pptVIP

六、模拟农田生态系统 ■ 这类生态系统是模拟农田条件，而没有陆生动物。 ■ 应用最广泛的是纳什(NaSh)等发展的农业生态系统，它是为同时测定农药在土壤、植物、水溶液和空气中的残留而设计的。 ■ 系统由容积为0.75 m3的矩形玻璃室组成，内装厚为15 cm以上的土壤层。设有收集土壤沥滤液和地表水的小孔、水管口和空气出口，以及一些用喷水装置和测试探讨的小孔。 ■ 系统的主要特点 通过玻璃室模拟微风并能收集挥发的农药 ■ 系统用于测量下列变化 （1）测定农药从植株上或土壤中的挥发性； （2）模拟降雨对农药迁移的影响 （3）农药在土壤中的残留 （4）农药被植株摄入和在植物体内的滞留 ■ 该系统缺少预定空气流速、温度和湿度的功能，况且代谢产物也没有空气中回收。 有丝分裂 人的体细胞染色体 ■ 试验方法 将CHO细胞或人类外周血淋巴细胞于37度培养24或72h，同时加入受试物。收获细胞前2h，加入秋水仙碱，使大量分裂细胞同步于分裂中期。经离心得到细胞沉淀，经固定、制片和染色，镜检有无染色体畸变。观察计数各种类型畸变，如断裂、缺失、易位及多处断裂等。 3.细胞遗传学试验——微核试验 ■ 微核: 是染色单体或染色体的无着丝点断片或因纺锤体受伤而失去的整个染色体，在分裂后期，仍留在细胞质中，或因核膜受损后，核物质向外突出延伸形成的一个或几个有规则的圆形或椭圆形小体，其嗜染性与细胞核相似，比主核小，故称微核。 ■ 一切发生分裂的细胞，在染色体断裂剂作用下，均能产生微核，因此可用微核率的变化来检测诱变物。 4.体内基因突变试验 (1)显性致死突变试验 （Dominant Lethal Mutation Test） ■ 检测外来化合物对动物生殖细胞染色体的致突变作用。 ■ 系统观察胎鼠的成活情况 因为哺乳动物生殖细胞染色体发生突变时（染色体断裂或重组），往往不能与异性生殖细胞结合，或使受精卵在着床前死亡和胚胎早期死亡。 (2)果蝇伴性隐性致死试验 ■ 遗传学原理 致突变物可能在雄性果蝇配子X染色体上诱导隐性致死突变。 ■ 将经处理的雄蝇与未处理的雌蝇交配，F1代雌蝇带有来自父本的具致死突变的X染色体。由于致死突变为隐性，所以F1蝇仍能够正常生长、发育和生殖。 ■ 将F1雌蝇与子一代雄蝇交配，则将有半数雄合子是含有经受试物处理的雄蝇的X染色体，此时X染色体上隐性致死基因得以表现，引起此雄蝇死亡。 (3)姐妹染色单体交换试验 （Sister Chromatide Exchange Test，SCE） ■ SCE可能与DNA的断裂和重联相关。 ■ 很多化学致突变物或致癌物可以大幅度地 增加SCE频率。 ■ 实验方法 以5-溴脱氧尿嘧啶核苷（Brdu）代替胸腺嘧啶核苷，DNA复制后，用荧光染料染色，可观察到SCE。 5.染色体损伤试验 — DNA修复合成试验 （Unscheduled DNA Synthesis，UDS） ■ 细胞对其损伤DNA具有修复能力。 ■ 细胞与化学物质接触后，若能诱导DNA修复合成，即可据此推断该化学物质具有损伤DNA的潜力。 ■ 实验方法 用羟基脲抑制细胞周期中S期的DNA半保留复制，用标记的脱氧胸腺嘧啶核苷(3H-TdR)掺入法测定非S期DNA合成的3H-TdR 量。 二、致畸效应 1.基本概念 致畸作用（Teratogenesis） ■ 胚胎在发育过程中，由于受到某种因素的影 响，使胚胎的细胞分化和器官形成不能正常 进行，而造成器官组织上的缺陷，并出现肉 眼可见的形态结构异常者成为畸形。 ■ 凡能引起胚胎发育障碍而导致胎儿发生畸形 的物质称为致畸物或致畸原（Teratogen）。 ■ 1000多种环境因素可引起动物和人的畸胎。 致畸作用的毒理学特点 ■ 胚胎与致畸物接触时，可因胚胎所处 的发育阶段不同而呈现不同的敏感性。 如器官形成期。 ■ 不同种属在致畸作用中呈现不同的敏 感性。 化学致畸作用机理 ■ 突变引起胚胎发育异常。 ■ 对细胞的生长分化较为重要的酶类受到 抑制。 ■ 母体正常代谢过程被破坏。 ■ 细胞分裂过程的障碍：引起生殖细胞减 数分裂中的不分离或细胞有丝分裂过程 的障碍等，均可使某些细胞死亡。 2.试验方法 ■ 动物选择 动物对受试物的代谢过程应基 本上与人类相似（大鼠、小鼠和家兔）。 ■ 剂量分组 采用鼠类为实验动物，每组不 少于15-20只，一般剂量为LD50的1/3-1/2 为高剂量组，LD50的1/30-1/100为低剂量组。 ■ 受试动物处理：受孕，灌胃方法染毒 ■ 受试动物解剖：胎仔外部检查、骨骼检查 内脏检查等。 三、致癌效应 1.基本概念 ■ 化学致癌作用 化学物质引