第19章 免疫缺陷及免疫应用（参考）.pptVIP

* * * 检测各群体淋巴细胞的数量与功能是观察机体免疫状态的重要手段。外周血是病人主要的检测标本，但仅代表再循环的淋巴细胞。实验动物还可取胸腺、脾、淋巴结等作为标本进行检查。 二、免疫细胞的检测 PBMC 多形核白细胞 红细胞 血浆 分离液 玻璃平皿 单核细胞吸附,未吸附的为淋巴细胞. 根据比重的不同将血液离心分层 取PBMC 一 免疫细胞的分离 1.外周血单个核细胞的分离 常用密度梯度离心法 2.亚群的分离 尼龙棉柱分离----B细胞 E花环分离---------T细胞 流式细胞术 免疫磁珠 T E花环 流式细胞仪工作原理 3、淋巴细胞亚群的计数 根据表面标志不同，分类计数 免疫荧光 酶免疫组化 流式细胞术 二、免疫细胞功能测定 1、T细胞功能试验： T细胞增殖试验 3H-TdR掺入法 MTT法 细胞毒试验 2、B细胞功能测定：溶血空斑试验 3、皮肤实验： 检测细胞免疫功能 淋巴细胞转化试验（形态学示意图） 原理：人T细胞表面有PHA或ConA受体，T细胞在体外受PHA或ConA的刺激后能转化为体积较大、代谢旺盛、且能进行分裂的淋巴细胞，以此测定T细胞的功能。 PHA刺激 48~72小时 三、免疫分子检测 四、免疫学诊断与监测 免疫预防 应用生物制品接种，使机体产生对相应疾病免疫力的方法。 中国古代种人痘 Boy with smallpox?? 1979年WHO宣布在全球范围内消灭了天花病毒。 机体获得特异性免疫通过两种方式： 自然免疫 人工免疫 人工免疫概念及种类 人工免疫：指有计划、有目的地给机体输入抗原、特异性抗体或免疫细胞等制品，使机体获得对某种疾病的特异性抵抗力，从而达到预防或治疗某些疾病的方法。 人工主动免疫 人工被动免疫 人工主动免疫： 是给机体输入疫苗或类毒素等抗原物质，剌激机体产生特异性免疫力。 1、灭活疫苗：用物理或化学的方法将病原微生物杀死制备而成的制剂。又称死疫苗。2、减毒活疫苗：用人工变异或从自然界筛选获得的减毒或无毒的活的病原微生物制成的制剂。又称活疫苗。3、类毒素：用0.3-0.4%甲醛处理外毒素，使其失去毒性，保留抗原性的物质。4、新型疫苗：亚单位疫苗、合成疫苗、基因工程疫苗 减毒活疫苗 Attenuated Vaccines 卡介苗 Bacillus Calmette-Guerin（BCG） 风疹 Rubella 水痘 Varicella 麻疹 Measeles 腮腺炎 Mumps 脊髓灰质炎 Polio 轮状病毒 Rotavirus 甲肝 Hepatitis A 黄热病 Yellow fever 灭活疫苗 Inactivated Vaccines 狂犬病 Rabies 伤寒 typhoid 霍乱 cholera 流行性感冒 Influenza 百日咳 pertussis Comparison of attenuated and inactivated vaccines 特点 制剂特点 接种剂量及次数 恢复倾向 无毒或减毒的活微生物 量较小一般仅需要一次 相对稳定性 不稳定 可以回复为毒株 强毒死微生物 量较大需要多次接种 较稳定 不回复为毒株 免疫效果 较好维持3-5年甚至更长 较差维持半年至一年 活疫苗 死疫苗 诱导的免疫类型 体液免疫和细胞免疫 体液免疫为主 人工被动免疫： 指应用人工的方法直接给机体输入免疫效应分子，使其获得特异性免疫力，到达紧急预防和治疗的目的。 1、抗毒素：是抗细菌外毒素的抗体。多为马血清制剂，具有抗体性和免疫原性。 2、人丙种球蛋白：从正常人血浆或健康产妇胎盘中提取制成。 3、人特异性免疫球蛋白：来源于恢复期病人及含高价特异性抗体供血者血浆，或接受类毒素和疫苗免疫者的血浆。 项 目 人工主动免疫 人工被动免疫 输入物质 抗原 抗体 产生免疫力时间 慢（2-3周） 快（输注即生效） 免疫力维持时间 数月至数年 2-3周 主要用途 预防