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选修1.4
【解析】(1)PCR是体外扩增DNA的方式,通过高温使双链解开,体内DNA的复制则是通过解旋酶使DNA双链解开。 (2)由题意可知重型β地中海贫血症是隐性遗传病,突变后的序列可以被剪切成m和s两个片段,而正常序列无法被剪切,因此母亲、父亲、患儿和胎儿的基因型分别为AA、Aa、aa和Aa。母亲和父亲的基因型为AA和Aa,生下患儿可能是因为母亲的原始生殖细胞通过减数分裂产生配子时发生了基因突变。由图可知,该突变为由模板链上的GTC突变成ATC,mRNA上由CAG变成UAG,因此终止密码子提前出现,使翻译提前终止。 答案:(1)高温 解旋酶 (2)Aa 母亲 减数分裂 mRNA上编码第39位氨基酸的密码子变为终止密码子,β链的合成提前终止,β链变短而失去功能 【延伸探究】电泳法只能分离蛋白质分子吗?试分析原因。 提示:不是。电泳是指带电粒子在电场的作用下发生迁移的过程,该方法除用于分离蛋白质外,也可用于分离大小不等的DNA片段等。 2.(2015·西安模拟)血红蛋白是人和其他脊椎动物红细胞的主要组成成分,负责血液中O2和部分CO2的运输。请根据血红蛋白的提取和分离回答问题: (1)凝胶色谱法的基本原理是根据____________________分离蛋白质的有效方法。 (2)洗涤红细胞的目的是去除 ,洗涤次数过少,无法除去 ;离心速度过高和时间过长会使 等一同沉淀,达不到分离的效果。洗涤干净的标志是 。释放血红蛋白的过程中起作用的是 。 (3)洗脱的液体应尽量与浸泡凝胶所用的液体 (填“相同”或“不同”),洗脱时,对洗脱液的流速要求是 。 (4)在洗脱过程中加入物质的量浓度为20 mmol/L的磷酸缓冲液(pH为7.0)的目的是 ,如果红色区带 ,说明色谱柱制作成功。 【解题指南】(1)关键词:“洗涤红细胞”“离心速度”“释放血红蛋白”。 (2)隐含信息:红色区带为血红蛋白。 【解析】(1)凝胶色谱法是根据蛋白质的相对分子质量大小分离蛋白质的有效方法。 (2)洗涤红细胞的目的是去除血浆蛋白等杂蛋白,如果洗涤次数过少,无法除去血浆蛋白;离心速度过高和时间过长会使白细胞等一同沉淀,达不到分离的效果。洗涤干净的标志是离心后的上清液中没有黄色。释放血红蛋白的过程中起作用的是蒸馏水和甲苯,其中蒸馏水的作用是使红细胞吸水破裂,甲苯可溶解细胞膜,加入甲苯能加速红细胞破裂并释放血红蛋白。 (3)洗脱的液体应尽量与浸泡凝胶所用的液体相同,否则会影响洗脱液的pH,使蛋白质的结构受到破坏。洗脱时,洗脱液的流速要保持稳定,否则将影响蛋白质的分离效果。 (4)在洗脱过程中加入物质的量浓度为20 mmol/L的磷酸缓冲液(pH为7.0)的目的是准确模拟生物体内的生理环境,保持体外的pH和体内的一致,进而保持蛋白质的正常形态结构;洗脱时,血红蛋白的颜色可以指示血红蛋白的位置,因此当红色区带均匀一致地移动时,说明色谱柱制作成功。 答案:(1)相对分子质量的大小 (2)杂蛋白(血浆蛋白) 血浆蛋白 白细胞 离心后的上清液中没有黄色 蒸馏水和甲苯 (3)相同 保持稳定 (4)准确模拟生物体内的生理环境,保持体外的pH和体内的一致 均匀一致地移动 【延伸探究】在血红蛋白的提取过程中,哪些过程能影响血红蛋白提取的纯度? 提示:①细胞的洗涤次数:次数少,不能除去血浆蛋白。 ②离心速度和时间:离心速度过高和时间过长,会使白细胞等一同沉淀,得不到纯净的红细胞。 ③透析:透析不彻底,会含有小分子杂质。 ④色谱柱的装填:不能存在气泡,若存在气泡,则会降低分离效果。 ⑤洗脱:洗脱液的流速要保持稳定,否则将影响蛋白质的分离效果。 3.(2015·临沂模拟)某生物兴趣小组开展DNA粗提取的相关探究活动。具体步骤如下: 材料处理:称取新鲜的花菜、辣椒和蒜黄各2份,每份10 g。剪碎后分成两组,一组置于20℃,另一组置于-20℃条件下,保存24 h。 DNA粗提取: 第一步:将上述材料分别放入研钵中,各加入15 mL研磨液,充分研磨。用两层纱布过滤,取滤液备用。 第二步:先向6只小烧杯中分别注入10 mL滤液,再加入20 mL体积分数为95%的冷酒精溶液,然后用玻璃棒缓缓地向一个方向搅拌,使絮状物缠绕在玻璃棒上。 第三步:取6支试管,分别加入等量的2 mol/L的NaCl溶液溶解上述絮状物。 DNA检测:在上述试管中各加入4 mL二苯胺试剂。混合均匀后,置于沸水中加热5 min,待试管冷却后比较溶液的颜色深浅,结果如下表。 ++++ ++ +++ -20℃ +++ + ++ 20℃ 蒜黄 辣椒 花菜 材料保存温度 (注:“+”越多表
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