第四章 病毒与亚病毒（参考）.pptVIP

PrPc PrPSc 作业 1、以E.coli T偶数噬菌体为例，阐述病毒繁殖过程？ 2、什么是一步生长曲线？它可分几期？各期有何特点？ 2、噬菌体效价的测定 (1) 效价：表示每ml试样所含的具有侵染性的噬菌体粒子数。 (2) 双层平板法 底层（~2%琼脂培养基7~8 ml） 双层平板法 培养基（~1%琼脂培养基3ml） 上层 宿主菌悬液（对数期菌0.2ml） 噬菌体试样（稀释0.1ml） 双层平板噬菌斑效价 低：只计有侵染性的 (3) 成斑率 = ——————---—— 电镜直接计数效价 高：噬菌体总数 噬菌体成斑率一般为：50%左右；动物或植物病毒为：10%左右 混匀 计数噬菌斑 37℃ 10h 一步生长曲线可分为三个时期： ①潜伏期 ②裂解期 ③稳定期 3、一步生长曲线 定量描述烈性噬菌体生长规律的实验曲线称作一步生长曲线。 （1）潜伏期：是指病毒侵入宿主细胞到病毒粒子释放出胞外前的一段时间。 潜伏前期又称隐蔽期（eclipse phase），是指病毒的核酸侵入宿主细胞后至第一个病毒粒子装配前的一段时间，此时宿主细胞内不含有完整的、有侵染力的成熟病毒粒子。 潜伏后期，病毒粒子装配成熟，胞内具侵染性的成熟病毒粒子数目逐渐增，但没有释放出胞外。寄主细胞的裂解标志着潜伏期的结束。 （2）裂解期：是指宿主细胞迅速裂解，溶液中病毒粒子急剧上升的一段时间。病毒没有个体生长，其宿主细胞裂解也是突发的。 （3）平稳期：是指感染病毒的宿主细胞全部裂解，溶液中病毒效价达到最高点以后的时期。 4、温和噬菌体与溶源性（lysogeny） 某些噬菌体侵染细菌后，将自身基因组整合到细菌细胞染色体上，随寄主细胞分裂而同步复制，并不引起细菌裂解释放噬菌体，因而被称作温和噬菌体（temperate phage）。 这种噬菌体与细菌共存的特性称为溶源性（lysogeny）， 被侵染的细胞被称作溶源性细胞或溶源菌（lysogen），整合到细菌细胞染色体上的病毒被称作前病毒或前噬菌体（prophage）。 细胞反复分裂 溶原途径 裂解途径 λ噬菌体的裂解和溶原途径 溶源性特点： （1）溶源性转变（lysogenic conversion）：温和噬菌体在菌体细胞内以前噬菌体形式存在可导致宿主细胞的表型改变，这种改变称为溶源性转变。 （2）免疫作用：前噬菌体还导致溶源性细菌对同类型噬菌体的侵染具有免疫作用，阻止携带与溶源性菌体所含的前噬菌体DNA相同的噬菌体的吸附和生物合成，但这种免疫作用不能阻止溶源菌体被别种类型的温和噬菌体或烈性噬菌体所侵染。 （3）致病性改变：某些溶源菌体还因所含的前噬菌体的作用导致致病性改变。例如，白喉棒状杆菌（Corynebecterium diphtheriae）和肉毒梭状芽孢杆菌（Clostridium botulinum），若不含有前噬菌体，是不会引起人类疾病的；一旦被相应的温和噬菌体侵染，含有了编码毒素基因的前噬菌体后，就从不产生毒素的菌株转变为产毒素的菌株，造成侵染组织的损伤，分别引发白喉和肉毒中毒症状。 （4）溶源性可以是可逆的：前噬菌体可以自发地或在外界刺激诱导下被激活，裂解寄主细胞，进入裂解途径。前噬菌体离开细菌基因组进入裂解途径的几率很低（约1/10000-1/100000）。 植物病毒没有专门的吸附结构，通过昆虫口器、摩擦伤口和人为伤口进入寄主细胞。植物病毒在入住宿主细胞后脱去蛋白质外壳。