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n第九章荷术动物手术
* * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * 双标记物法 T型瘘管所采得食糜样本,往往很难真正代表食糜的实际情况 在消化道内许多食糜的颗粒部分和液相内的溶质部分流通速度不一样,颗粒部分往往存留时间长; 食糜采样过程中食糜的颗粒相和液相极易分离 因此,国际上普遍推崇双标记物法来测定食糜的流通量 非同位素标记物法 原 理 往动物瘤胃内连续灌注Cr-EDTA,使其标记食糜的液相;采用连续灌注或一次性灌注法。然后在不同的时间点由T型瘘管采样。最后根据食糜标记物的浓度,即可计算出消化道内不同部位的食糜流通量。 操 作 连续灌注 采样测本底值 启动灌注 连续灌注:1~4天 灌注、采样:5~7天 停止灌注、采样:9~11天 大剂量一次性灌注 采样测本底值 大剂量一次性灌注 采样:持续3~4天 计 算 C——在t时所采得的瘤胃食糜样本内Cr的浓度; C0——在t=0时瘤胃食糜样本内Cr的浓度; K, t——分别为稀释常数和采样时间。 在计算十二指肠、回肠内食糜流通量时, C0可由各次采样中最高的浓度来代表,并用以上公式计算即可。 优缺点 与同位素方法比较,耗资较低,不需要具有进行同位素操作和分析那样严格的实验室条件 不如同位素法简单、灵敏 四、动-静脉差减法测定组织器官营养物质代谢 原 理 选择合适的部位插入动脉和静脉导管,恒速持续灌注示踪氨基酸,测定动-静脉中该氨基酸和示踪氨基酸的含量、丰度以及血流量 可计算出灌注区该组织器官对该氨基酸的摄人量、沉积量以及蛋白质的合成和降解 苯丙氨酸是常用的示踪氨基酸,因为它在肌肉中不被氧化。 优缺点 此法的成败主要取决于血管插管的部位是否正确 最理想的是被测定的组织器官只有一个动脉进口和一个静脉出口。有多个进口和出口时,手术、测定和计算都将变得十分复杂 操 作 慢性血插管的安装 连续饲喂或连续营养灌注 连续灌注标记物,不同时间点采样 慢性血插管的安装 术前准备 选择体况良好的绒山羊,术前禁食48h,禁水12h 手术器械和材料等的准备按常规方法进行 肝素配置成200IU/ml灭菌生理盐水,置于0--4℃保存 插管选自医用临床介入血管导管和硅胶导管 门静脉、颈动脉插管选用5F 的医用临床介入血管导管(内径1.2mm) 肠系膜静脉导管选用0.9×2型的硅胶导管(内径 1mm) 9号、12号磨秃针头,三通塑料阀 准备导入针头。 羊右侧卧,保定 适量静松灵肌肉注射进行全身麻醉 手术部位剪去羊毛后,用肥皂水清洗,刀片刮净毛茬,用新洁尔灭溶液冲洗,5%碘酊消毒,75%酒精脱碘,铺好创布 慢性血插管的分类 肝脏和PDV组织血插管 皮肤组织血插管 肌肉组织血插管 肝静脉、门静脉、肠系膜静脉插管安装 手术部位:沿最后肋骨缘,自背中线处向下切一长约10cm的刀口。 动--静脉血管插管的安装示意图,见附图 肝脏 LIVER 肝动脉 HEPATIC ARTERY 后腔静脉 门静脉 PORTAL VEIN 肝静脉 HEPATIC VEIN 肠系膜静脉 MESENTERIC VEIN PAH INFUSION SAMPLE SAMPLE POST CAVA SAMPLE 绵羊内脏肠管结构模型图(引自Huntington等,1989) a、隔膜;b、肝脏;c、胆囊;d、门静脉;e、胃脾静脉;f、空肠;g、前肠系膜静脉;h、肠系膜静脉侧枝;i、肠系膜静脉远端分枝;j、盲肠;k、回盲静脉;l、大肠; I、灌注对氨基马尿酸(PAH)需做插管处;M、采集肠系膜血液需做插管处;P、采集门静脉血液需做插管处;H、采集肝静脉需做插管处 H 操作 用纱布和腹拉钩将肠管塞入腹腔,肝叶下压,暴露肝静脉与膈肌结合位点。在肝静脉预插入导管的部位周围,用医用无损伤缝合针线做荷包缝合;将已套入门静脉插管的导入针头快、准、一次成功斜插入肝静脉。 用纱布和腹拉钩将肠管塞入腹腔,肝叶上翻,暴露门静脉。在门静脉淋巴结附近,即门静脉预插入导管的部位周围,用医用无损伤缝合针线做荷包缝合;将已套入门静脉插管的导入针头快、准、一次成功斜插入门静脉。 用于采集肠系膜静脉血液的插管选在小肠的毛细血管首次汇入主肠系膜弓处,将约2cm长的一段剥离,离心端结扎,从向心端导入肠系膜静脉插管,导入长度约7cm,缝线结扎固定 。 另一根肠系膜静脉插管选在采样管上游约2
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