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基 因 工 程 (Gene Engineering) ----绪论 基因？？ 基因工程： 通过基因操作，将目的基因或DNA片段与合适的载体连接转入目标生物细胞，通过复制、转录、翻译外源目的基因以及蛋白质的活性表达，使转基因生物获得新的遗传性状的操作。 基因操作： 指对基因进行分离、分析、改造、检测、表达、重组和转移等操作的总称。 优点： 1、打破了难以突破的物种之间的界限。 可以使原核生物与真核生物之间、动物与植物之间、甚至人与其他生物之间的遗传信息进行重组和转移。 2、物种的定向改良； 3、创造新物种； 4、基因治疗； ………………….. SWEET POTATO 羽状花叶病毒(sweet potato feathery mottle virus，SPFMV) 将半胱氨酸蛋白酶抑制剂基因(Oryzacystation I，OCI)导入甘薯品种， 获得抗SPFMV的甘薯新品种，解决田间带毒率50％以上，产量损失可达30％以上。解决甘薯因病毒病退化的问题。 理论依据： 1 不同基因具有相同的物质基础 2 基因是可以切割的 3 基因是可以转移的 4 多肽与基因之间存在对应关系 5 遗传密码是通用的 6 基因可以通过复制把遗传信息传给下一代 基因工程的技术流程 1 目的基因的克隆 目的基因是人们所需要转移或改造的基因。 苏云金芽孢杆菌（Bacillus thuringiensis）的抗虫基因 植物的抗病（抗病毒、抗细菌）基因 种子贮藏蛋白的基因 人的胰岛素基因、干扰素基因 来源： ⑴从供体细胞的DNA中直接分离基因 ⑵人工合成基因 基因操作的基本步骤 2 载体的准备 载体(vector)：能携带外源基因（或DNA片段）进入细胞复制、整合或表达的工具。 例：质粒载体 λ噬菌体载体 M13噬菌体载体 人工染色体载体 基因操作的基本步骤 3 目的基因与载体的连接 4 重组DNA的转化、转染、转导 常用的宿主细胞有： 大肠杆菌 枯草杆菌 土壤农杆菌 酵母菌 动植物细胞 基因操作的基本步骤 5 重组体的筛选和鉴定 6 重组体的大量培养，外源基因表达效应分析与开发应用。 检测：通过检测标记基因的有无来判断目的基因是否导入。 表达：通过特定性状的产生与否来确定目的基因是否表达。 基因操作的基本步骤 基因工程研究简史 1859 年????英国生物学家达尔文发表《物种起源》，第一次用大量事实和系统的理论论证了生物进化的普遍规律。 1865 年????瑞士科学家米歇尔发现核酸。 1866 年????奥地利生物学家孟德尔发表论文 “ 植物杂交试验 ” ，提出了遗传学的分离定律、自由组合定律和遗传因子学说。 1879 年????德国生物学家弗莱明发现细胞核内的染色体。 1903 年????美国细胞学家萨顿发现了遗传因子与染色体的平行关系，提出了遗传的染色体学说。 1915 年????美国生物学家摩尔根创立了现代遗传学的基因学说 基因工程研究简史 1924 年????德国细胞学家福尔根发现了核糖核酸（ RNA ）和脱氧核糖核酸（ DNA ）。 1927 年???? 美国遗传学家缪勒发现 X 射线照射可人工诱使遗传基因发生突变。 1929 年???? 俄裔美国生物化学家列文发现核酸碱基的主要成份是腺膘呤、鸟膘呤、胸腺嘧啶、胞嘧啶。 1938 年???? 美国生物学家、遗传学家比德尔与美国生物化学家塔特姆提出遗传基因通过一定的化学反应起作用的理论。 1943 年?? 德裔美国生物学家、物理学家德尔布吕克，意大利裔美国生物学家卢里亚，美国遗传学家赫尔希合作发现了病毒的复制机制。1952年，他们又分别发现在上述复制机制中起决定性作用的遗传物质是 DNA 。 基因工程研究简史 1944 年?? 美国细菌学家艾弗里首次证明 DNA 是遗传信息的载体。 1946 年?? 美国生物化学家塔特姆与美国遗传学家莱德伯格合作发现了两种细菌混合培养时发生了 “ 杂交 ” 现象，实现了基因重组。 1948 年?? 挪威科学家弗伯格提出了 DNA 螺旋