2 植物细胞工程的理论基础课件.pptVIP

定义：一个细胞所具有的产生完整生物个体的固有能力称之为细胞的全能性。 细胞全能性的绝对性与相对性:（1）从理论上讲，所有细胞（体细胞、性细胞）在离体条件下均能发育成完整的植株。（2）但实际上，不是所有基因型的所有细胞在任何条件下都具有良好的培养反应；细胞全能性并不意味着任何细胞均可以直接产生植物个体；植物细胞全能性的表现程度存在明显的差异。 2.影响细胞脱分化的因素 损伤 植物生长调节剂 光照 细胞位置 外植体的生理状态 植物种类差异 定义：指在植物组织培养中，对处于脱分化状态的植物细胞或组织重新进行分化，形成另一种或几种类型的细胞、组织、器官，甚至形成完整植体的过程。 类型: 胚状体发生途径 　器官发生途径 　　　①先形成芽，后在芽基部长根； 　　　②先形成根，后在根基部生芽； 　　　③分别形成芽和根，然后产生输导组织连接； 　　　④仅形成根或芽。 再分化的影响因素 理论上所有的细胞都可再生植株，但目前还做不到，主要原因： ①不同植物种类再分化的能力差异很大； ②对某些植物的植株再生条件还没有完全掌握。 四.愈伤组织培养 定义：脱分化后的细胞，经过细胞分裂，产生无特定组织结构、无明显极性的、松散的细胞团称为愈伤组织（Callus）。 愈伤组织的形成、生长和保持 形成：诱导期、分裂期、分化期 生长：继代培养会引起次生代谢物质的积累水平或能力的变化、延长培养期可导致生长素的自给或自养，出现驯化现象。 质地：分疏松型和致密型两类。生长素和细胞分裂素的含量影响其质地。 种类 1、胚性愈伤组织 （Embryonenic callus）：表面光滑、组织结构紧凑、细胞小、再生力强。胚性愈伤组织容易形成胚状体，所以被称为胚性愈伤组织2、非胚性愈伤组织：表面粗糙、组织结构疏松、细胞大。 保持 在愈伤组织继代过程中，会出现生长势下降、褐变、分化和形态发生能力降低甚至丧失。 原因： 　遗传（染色体畸变、基因畸变） 生理因素（激素平衡、细胞对生长调节物质的敏感性发生了变化，可通过培养条件的改变而恢复。） 类型：胚性愈伤易保持；非胚性愈伤保持较困难。 愈伤组织状态调控 优良愈伤的特性： 　　　　①旺盛的自我繁殖能力 　　　　②容易散碎 　　　　③高度的再分化（胚性、器官）能力 　　　　④经过长期继代而不改变原有能力 采取的措施；　 　　　　①选择适当的基因型和适当外植体 　　　　②选择正确的培养基（种类、浓度、激素类物质配比） 　　　　③采取特殊手段防止培养过程中不良因素 　　　　　的发生 §2. 离体条件下植物的形态发生 一．器官发生途径 二．胚状体发生途径 　１．概念： 　　植物的离体器官的发生：培养条件下的组 　织或细胞团（愈伤组织）分化形成不定根（adventitious roots）、不定芽（ adventitious shoots）等器官的过程。 　　不定根：从茎、叶上生出的根叫做不定根  不定芽：不是从叶腋或枝顶发出，而是从叶子、根上或从树干上发出的芽。 通过器官发生形成再生植株大体上有三种方式： 第一种方式是先芽后根；如小麦，芦荟、苹果 第二种方式为先根后芽；如枸杞、苜蓿等 第三种方式是在愈伤组织的不同部位形成芽和根，再通过维管组织的联系形成完整植株。如胡萝卜、石刁柏 3．器官发生途径的类型 间接发生：经愈伤组织后形成器官 直接发生：外植体不经过典型的愈伤组织即可直接形成器官原基。 二．胚状体发生途径 １．概念： 植物胚胎发生：植物胚的发育过程。（双子叶植物胚胎发生过程：原形胚、球形胚、心形胚、鱼雷形胚、成熟胚） 胚状体：在植物组织培养过程中起源于一个非合子胚细胞，经过胚胎发生和胚胎发育过程形成的具有双极性的胚状结构。 体细胞胚胎发生：植物离体培养细胞产生胚状体的过程。（200多种）　 　成熟的胚状体可以像合子胚一样长出根、芽，萌发再生植株。 2.体细胞胚胎的发生方式 直接发生途径： 不经过愈伤组织 间接发生途径： 经过愈伤组织 3.体细胞胚胎的发生过程 一般体细胞胚的发生需经5个阶段： 胚性愈伤组织的诱导、 体细胞胚胎诱导、 体细胞胚胎早期分化发育、 体细胞胚胎成熟、 体细胞胚胎萌发和成苗 4.体细胞胚胎的起源 绝大多数体细胞胚胎起源于单细胞，所以在遗传转化中，如果能获得胚状体发生途径的高效再生体系，是最理想的转化条件。 二、培养材料的生理状态 1.植株的发育年龄 幼态组织﹥老态组织 2.培养器官或组织类型 3.培养时间和细胞倍性 2.培养器官或组织类型 同一植物不同器官再生能力不同 同