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3、接下来,人们不禁又要问在三联体中的每个碱基作为信息只读一次还是重复阅读呢?以重叠和非重叠方式阅读DNA序列会有什么不同呢? 《思考与讨论》 遗传密码的试拼与阅读方式的探索 4、1957年Brenner.S发表了一篇令人兴奋的理论文章,他通过蛋白质的氨基酸顺序分析,发现不存在氨基酸的邻位限制作用,从而否定了遗传密码重叠阅读的可能性。同时人们也发现在镰刀形细胞贫血的例子中,血红蛋白中仅有一个氨基酸发生改变。 5、很遗憾,伽莫夫也许是考虑到效率的问题,认为一个碱基可能被重复读多次,也就是说遗传密码的阅读是完全重叠的,因此氨基酸数目和核苷酸数目存在着一对一的关系。 智者千虑,必有一失。很多著名的科学家也有过类似的失误。在资料较少的情况下,对未知的真理作出推断,难免会发生偏差,但瑕不掩瑜,人们对他们的那种敏锐、大胆、睿智和创新的精神,巧妙的构思仍敬佩不已。 五、遗传密码子的验证(克里克的实验) 他们用T4噬菌体染色体上的一个基因通过用原黄素处理,可以使DNA脱落或插入单个碱基,插入叫“加字”突变,脱落叫“减字”突变,无论加字和减字都可以引起移码突变。Crick小组用这种方法获得一系列的T4噬菌体“加字”和“减字”突变,再进行杂交来获得加入或减少一个,二个,三个的不同碱基数的系列突变。 通过这样的方法他们发现加入或减少一个和二个碱基都会引起噬菌体突变,无法产生正常功能的蛋白,而加入或减少3个碱基时却可以合成正常功能的蛋白质,为什么会这样呢? 六、遗传密码对应规则的发现 1961-1962年,尼伦伯格(M.W.Nirenberg,1927~)和马太(H.Matthaei) 的实验 : 这一结果不仅证实了无细胞系统的成功,同时还表明UUU是苯丙氨酸的密码子。 这是第一个遗传密码子被破译。尼伦伯格的实验巧妙之处在于利用无细胞系统进行体外合成蛋白质,他这富有创新的实验方法为他带来了重大的成功! 对比克里克和尼伦伯格的实验 克里克的T4噬菌体实验 尼伦伯格体外蛋白质合成实验 主要 思路 通过研究碱基的改变对蛋白质合成的影响推断遗传密码的性质。 建立体外蛋白质合成系统,直接破解遗传密码规则。 前提 找到使DNA脱落或插入单个碱基的方法——原黄素处理 多核苷酸磷酸化酶的发现,为得到poly U提供条件 优势 不需要理解蛋白质合成过程,就能作出推断密码子的总体特征。 快速,直接 不足 证据相对间接,工作量较大。 需要首先了解细胞中蛋白质合成所需的条件。 在接下来的六七年里,科学家沿着体外合成蛋白质的思路,不断地改进实验方法,破译出了全部的密码子,并编制出了密码子表。这项工作成为生物学史上的一个伟大的里程碑!为人类探索和提示生命的本质的研究向前迈进一大步,为后面分子遗传生物学的发展有着重要的推动作用。 遗传密码的破译,测序方法的建立以及体外重组的实现是基因工程的三大基石。 课堂总结 我们注意整个破译过程中科学家思维的变化,薛定谔是以富有远见卓识的大胆的想象来预测遗传密码的形式的,伽莫夫通过数学的排列组合的计算来推测密码子是由三个碱基组成的,同时他也预测了密码的阅读方式,尽管智者千虑,必有一失,但巧妙的构思依然显示了其睿智和创新。克里克则是巧妙地设计实验,利用原黄素处理噬菌体,使DNA脱落或插入单个碱基的方法从实验上证明了伽莫夫的三联体密码子的推测,由理论走向实验,为密码子的破译迈出重要的一步。而尼伦伯格的实验则更富有创新性,他建立巧妙的无细胞系统进行体外蛋白质合成成功地破译了第一个密码子,随后的方法不断创新最终破译了所有的密码子。他的贡献不仅仅在于对遗传密码的破译,更重要的也在对生物研究方法上开启了新的思维方式。 归结起来,我们看到,敏锐、大胆、睿智和创新是科学家的重要素养,也正如尼伦伯格在1968年诺贝尔生理学或医学奖获时说过:一个善于捕捉细节的人才是能领略事物真谛的人。 项目 莫尔斯电码 遗传密码 密码间有无分隔符 长度是否固定 阅读方式是否重叠 密码所采用的符号 遗传密码的特点:不间断性;不重叠性;简并性;通用性。 有分隔符“/” 无分隔符 长度不固定,1到4个符号不等 长度固定,3个符号 非重叠方式阅读 非重叠方式阅读 — ? A C G U 1、在下列基因的改变中,合成出具有正常功能蛋白质的可能性最大的是:( ) A.在相关的基因的碱基序列中删除或增加一个碱基 B.在相关的基因的碱基序列中删除或增加二个碱基 C.在相关的基因的碱基序列中删除或增加三个碱基对 D.在相关的基因的碱基序列中删除或增加四个碱基对 C 课堂习题 D 2、最早提出3个碱基编码一个氨基酸的科学家和首次用实验
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