102气相色谱法操作规程[优化].doc

气相色谱法操作规程 起草部门 质检部 被替代文件 新文件 发放编号： 分发部门 质检部相关岗位 1 目的 规定气相色谱法测定纯度,含量及杂质的通用方法。 2 适用范围 适用于本公司含有可挥发成分的所有原料的主要成分和杂质的测定。 3 编写依据 《中华人民共和国药典》2005年版 4 职责 质检部检验员对本标准的实施负责。 5 内容 5.1 简述 气相色谱仪是以气相色谱法原理为基础而设计的仪器。仪器由气路系统、进样系统、柱分离系统、检测系统、上述三者的温度控制系统和数据采集系统组成。气相色谱法分析固态及液态样品时，是在加温状态下使样品处于气态，在载体上的固定液和载气间进行分配分离。 5.2 仪器与用具 5.2.1 气相色谱仪 5.2.2 积分仪 5.2.3 进样器 5.3对仪器的一般要求 所用的仪器为气相色谱仪。除另有规定外，载气为氮气；色谱柱为填充柱或毛细管柱，填充柱的材质为不锈钢或玻璃，载体用直径为0.25～0.18mm、0.18～0.15mm或0.15～0.125mm经酸洗并硅烷化处理的硅藻土或高分子多孔小球；常用玻璃或弹性石英毛细管柱的内径为0.20或0.32mm。进样口温度应高于柱温30～50℃；进样量一般不超过数微升；柱径越细进样量应越少。检测器为氢火焰离子化检测器，检测温度一般高于柱温，并不得低于150℃，以免水气凝结，通常为250～350℃。 正文中各品种项下规定的条件，除检测器种类、固定液品种及特殊指定的色谱柱材料不得任意改变外，其余如色谱柱内径、长度、载体牌号、粒度、固定液涂布浓度、载气流速、柱温、进样量、检测器的灵敏度等，均可适当改变，以适应具体品种并符合系统适应性试验的要求。一般色谱图约于30分钟内记录完毕。 5.4 系统适应性试验 按各品种项下要求对仪器进行适应性试验，即用规定的对照品对仪器进行试验和调整，应达到规定的要求；或按规定分析状态下色谱柱的最小理论板数、分离度和拖尾因子。 5.4.1 色谱柱的理论板数(n) 在选定的条件下，注入供试品溶液或各品种项下规定的内标物质溶液，记录色谱图，量出供试品主成分或内标物质峰的保留时间tR(以分钟或长度计，下同，但应取相同单位)和半高峰宽(Wh/2),按n=5.54(tR/ Wh/2)2计算色谱柱的理论板数，如果测得理论板数低于各品种项下规定的最小理论板数，应改变色谱柱的某些条件(如柱长、载体性能、色谱柱充填的优劣等)，使理论板数达到要求。 5.4.2 分离度 定量分析时，为便于准确测量，要求定量峰和其他峰或内标峰之间有较好的分离度。分离度(R)的计算公式为 R=[2(tR1 －tR2 )]/(W1 +W2) 式中tR1：相邻两峰中前一峰的保留时间； tR2：相邻两峰中后一峰的保留时间； W1 及W2 ：此相邻两峰的峰宽。 除另有规定外，分离度应大于1.5。 5.4.3 拖尾因子 为保证测量精度，特别当采用峰高法测量时，应检查待测峰的拖尾因子(T)是否符合各品种项下的规定，或不同浓度进样的校正因子误差是否符合要求。拖尾因子计算公式为： T=W0.05h /(2d1 ) 式中W0.05h：0.05峰高处的峰宽； 2d1：峰极至峰前沿之间的距离。 除另有规定外，T应在0.95～1.05间。 5.4.4 重复性 取各品种项下的对照溶液连续进样5次，除另有规定外，峰面积测量值的相对标准偏差应不大于2.0%。也可按各品种校正因子测定项下，配制相当于80%、100%和120%的对照品溶液，加入规定量的内标溶液，配成三种不同浓度的溶液，分别注样3次，计算平均校正因子，校正因子间的相对标准偏差应不大于2.0%。 5.5 测定法 5.5.1 内标法加校正因子测定供试品中某个杂质或主成份含量 按各品种项下的规定，精密称(量)取对照品和内标物质，分别配成溶液，精密量取各溶液，配成校正因子测定用的对照溶液，取一定量注入 仪器，记录色谱图，测量对照品和内标物质的峰面积或峰高，按下式计算校正因子： 校正因子(f)=(As/ms)/(Ar/mr) 式中 As ：内标物质的峰面积或峰高； ms ：加入内标物质的量； Ar ：对照品的峰面积或峰高； mr ：加入对照品的量。 再取各品种项下含有内标物质的供试品溶液，注入仪器，记录色谱图，测量供试品(或其杂质)峰和内标物质的峰面积或峰高，按下式计算含量： 含量(mx)=f×[AX/(As/ms) 式中 AX ：供试品(或其杂质)峰面积或峰高； mX ：供试品(或其杂质)的量。 f、As 和ms 的意义同上。 当配制校正因子测定用的对照溶液和含有内标物质的供试品溶液