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【考向解读】
1.基因工程的诞生(Ⅰ)
2.基因工程的原理及技术(Ⅱ)
3.基因工程的应用(Ⅱ)
4.蛋白质工程(Ⅰ)
5.植物的组织培养(Ⅱ)
6.动物的细胞培养与体细胞克隆(Ⅰ)
7.细胞融合与单克隆抗体(Ⅱ)
高频考点:基因工程的原理、操作步骤及操作工具;动物的细胞培养与体细胞克隆
中频考点:植物组织培养与植物体细胞杂交的原理及应用
低频考点:蛋白质工程及应用
【命题热点突破一】综合考查基因工程的原理及应用
1.目的基因应插入启动子与终止子之间的部位。
2.将目的基因导入受体细胞没有碱基互补配对现象。
3.原核生物作为受体细胞的优点:繁殖快、多为单细胞、遗传物质相对较少。
4.一般情况下,用同一种限制酶切割质粒和含有目的基因的片段,但有时可用两种限制酶分别切割质粒和目的基因,以避免质粒和质粒之间、目的基因和目的基因之间的连接。
5.标记基因的作用——筛选、检测目的基因是否导入受体细胞。
6.受体细胞常用植物受精卵或体细胞(经组织培养)、动物受精卵(一般不用体细胞)、微生物(大肠杆菌、酵母菌)等。
7.启动子(DNA片段)≠起始密码子(RNA);终止子(DNA片段)≠终止密码子(RNA)。
例1.(2015·广东高考改编)下图为培育转基因山羊生产人β-酪蛋白的流程图。
下列叙述正确的是( )
A.过程①所用的人β-酪蛋白基因可从人cDNA文库中获得
B.过程②可选用囊胚期或原肠胚期的胚胎进行移植
C.过程③可使用胚胎分割技术扩大转基因山羊群体
D.过程④人β-酪蛋白基因只能在细胞核内进行转录、翻译
【答案】 A
【变式探究】
(2015·全国卷Ⅰ)HIV属于逆转录病毒,是艾滋病的病原体。回答下列问题:
(1)用基因工程方法制备HIV的某蛋白(目的蛋白)时,可先提取HIV中的________,以其作为模板,在________的作用下合成________,获取该目的蛋白的基因,构建重组表达载体,随后导入受体细胞。
(2)从受体细胞中分离纯化出目的蛋白,该蛋白作为抗原注入机体后,刺激机体产生的可与此蛋白结合的相应分泌蛋白是________,该分泌蛋白可用于检测受试者血清中的HIV,检测的原理是__________________________________。
(3)已知某种菌导致的肺炎在健康人群中罕见,但是在艾滋病患者中却多发。引起这种现象的根本原因是HIV主要感染和破坏了患者的部分________细胞,降低了患者免疫系统的防卫功能。
(4)人的免疫系统有________癌细胞的功能。艾滋病患者由于免疫功能缺陷,易发生恶性肿瘤。
【解析】 (1)HIV的遗传物质是RNA,所以要想获得相应的目的基因,应以HIV的RNA为模板,在逆转录酶的作用下合成cDNA(或DNA)。
(2)目的蛋白注入机体后相当于抗原。在抗原的刺激下,机体进行体液免疫,由浆细胞产生相应抗体(分泌蛋白),由于该抗体能与目的蛋白(抗原)发生特异性结合,所以可通过抗体检测出有无目的蛋白,从而确定体内有无HIV。
(3)HIV主要攻击人体的T(或T淋巴)细胞,从而降低机体免疫系统的防卫功能。
(4)癌细胞在机体中属于抗原,人体的免疫系统能够监控和清除癌细胞。
【答案】 (1)RNA 逆转录酶 cDNA(或DNA) (2)抗体 抗原抗体特异性结合 (3)T(或T淋巴) (4)监控和清除
【命题热点突破二】综合考查蛋白质工程的原理及应用
基因工程和蛋白质工程的比较
比较项目 基因工程 蛋白质工程 原理 基因重组 中心法则的逆转 区别 过程 获取目的基因―→构建表达载体―→导入受体细胞―→目的基因的检测与鉴定 预期蛋白质功能―→设计预期的蛋白质结构―→推测应有的氨基酸序列→找到相对应的脱氧核苷酸序列―→合成DNA―→表达出蛋白质 区别 实质 定向改造生物的遗传特性,以获得人类所需要的生物类型或生物产品(基因的异体表达) 定向改造或生产人类所需要的蛋白质 结果 生产自然界中已经有的蛋白质 生产自然界中没有的蛋白质 联系 蛋白质工程是在基因工程的基础上延伸出来的第二代基因工程,对现有蛋白质的改造或制造新的蛋白质必须通过基因修饰或基因合成来实现
例2、 (2015·全国卷Ⅱ)已知生物体内有一种蛋白质(P),该蛋白质是一种转运蛋白,由305个氨基酸组成。如果将P分子中158位的丝氨酸变成亮氨酸,240位的谷氨酰胺变成苯丙氨酸,改变后的蛋白质(P1)不但保留P的功能,而且具有了酶的催化活性。回答下列问题:
(1)从上述资料可知,若要改变蛋白质的功能,可以考虑对蛋白质的________进行改造。
(2)以P基因序列为基础,获得P1基因的途径有修饰________基因或合成________基因。所获得的基因表达时是遵循中心法则的,中心法则的全部内容包括___
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