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学案DNA的粗提取与鉴定(2008-5-9教后整理)
课题1 DNA的粗提取与鉴定
一、课题目标
本课题通过尝试对植物或动物组织中的DNA进行粗提取，了解DNA的物理化学性质，理解DNA粗提取以及DNA鉴定的原理。
二、课题重点与难点
课题重点：DNA的粗提取和鉴定方法。课题难点：DNA的粗提取和鉴定方法。为什么反复地溶解与析出DNA，能够去除杂质？
在NaCl溶液浓度低于0.14 mol/L时，DNA的溶解度随NaCl溶液浓度的增加而逐渐降低；在0.14 mol/L时，DNA溶解度最小；当NaCl溶液浓度继续增加时，DNA的溶解度又逐渐增大。利用上述原理，可以将DNA溶于高浓度的NaCl溶液中，使其与其他物质分开。对于鸡血细胞来说蒸馏水是一种低渗液体，血细胞，使血细胞胀裂，再加上搅拌的机械作用，加速了鸡血细胞的破裂(细胞膜和核膜的破裂)，从而释放出DNA。洗涤剂能溶解细胞膜，有利于DNA的释放；食盐有利于DNA的溶解。会使细胞核内的DNA释放不完全，提取的DNA量少，看不到丝状沉淀物、用二苯胺鉴定不显示蓝色等用高盐浓度的溶液溶解DNA，能除去在高盐中不能溶解的杂质；用低盐浓度使DNA析出，能除去溶解在低盐溶液中的杂质。因此，通过反复溶解与析出DNA，就能够除去与DNA溶解度不同的多种杂质。可能含有核蛋白、多糖和RNA等杂质。方案二是利用蛋白酶分解杂质蛋白，从而使提取的DNA与蛋白质分开；方案三利用的是DNA和蛋白质对高温耐受性的不同，从而使蛋白质变性，与DNA分离。
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