酶工程重點整理总结.docVIP

绪论 何为酶工程，试述其主要内容和任务。 答：酶工程：酶的生产、改性与应用的技术过程。主要内容：微生物细胞发酵产酶，动植物细胞培养产酶，酶的提取与分离纯化，酶分子修饰，酶、细胞、原生质体固定化酶非水相催化，酶定向进化，酶反应器和酶的应用等。主要任务：经过预先设计，通过人工操作获得人们所需的酶，并通过各种方式使酶的催化特性得以改进，充分发挥其催化功能。 酶有哪些显著的催化特性？ 答：酶催化作用的专一性强酶催化作用的效率高酶催化作用条件温和。 简述影响酶催化作用的主要因素。 答：1）底物浓度的影响决定酶催化作用的主要因素。酶催化反应速度随底物浓度增加现增加在逐步趋向平衡再反而下降。2）酶浓度的影响底物浓度足够高的条件下，酶催化反应速度与酶浓度成正比。3）温度的影响适宜温度范围内，酶能进行催化反应，最适温度条件下，酶的催化反应速度达到最大。4）PH的影响适宜PH范围内，酶能显示其催化活性，最适pH条件下，酶催化反应速度达到最大。5）抑制剂的影响在抑制剂的影响下，酶的催化活性降低甚至丧失，从而影响酶的催化功能 简述酶活力单位的概念和酶活力的测定方法。 答：概念：每1min催化1μmol的底物转化为产物的酶量定义为1个酶活力单位（IU）。或在特定条件下，每秒催化1mol底物转化为产物的酶量定义为1Kat. 测定方法：化学测定法，光学测定法，气体测定法。 ⑩1982年切克发现SsRNNA前体具有自我剪接功能，认为RNA也具有催化活性，将这种有催化活性的RNA成为核酸类酶；1983年，阿尔特曼等发现核酸酶。 *2种命名法：国际酶学委员会与1961年在“酶学委员会的报告”中提出了酶的分类与命名方案，获得了“国际生物化学与分子生物学联合会”的批准。此后经过多次修订，不断得到补充和完善。根据国际酶学委员会的建议，每一种具体的酶都有其推荐名和系统命名：①推荐名是在惯用名称基础上，加以选择和修改，一般由两部分组成：底物名称+催化反应的类型+酶，不管酶催化的反应是正反应还是逆反应，都用一个名称，对于水解酶类，可省去“水解”；②系统命名法更详细、更准确的反映出该酶所催化的反应，系统命名包括了酶的作用底物、酶作用的基团及催化反应的类型。 *（1）蛋白类酶分为六大类：氧化还原酶、转移酶、水解酶、裂合酶、异构酶、合成酶或连接酶。（2）核酸类酶：①分子内催化R酶：自我剪切酶、自我剪接酶；②分子间催化R酶：RNA剪切酶、DNA剪切酶、多肽剪切酶、多糖剪接酶、氨基酸酯剪切酶、多功能酶。 *固定化酶的活力测定方法：振荡测定法、酶柱测定法、连续测定法、固定化酶的比活力测定、酶结合效率与酶活力回收率的测定。 *酶的生产方法：提取分离法、生物合成法、化学合成法。 微生物发酵产酶 试述酶生物合成的基本过程。 答：（）RNA的生物合成转录：转录的起始RNA链的延伸RNA链合成的终止RNA前体的加工（）蛋白质的生物合成翻译：氨基酸活化生成氨酰-tRNA肽链合成肽链的延伸肽链合成的终止蛋白质前体的加工酶生物合成的诱导作用？简述其原理。 答：加入某些物质使酶的生物合成开始或加速进行的现象，。原理：当培养基中以乳糖为惟一碳源时，细胞吸收乳糖为别乳糖。别乳糖作为诱导物与阻遏蛋白结合，使阻遏蛋白的结构发生改变，从而使它与操纵基因的结合力减弱，阻遏蛋白不能与操纵基因结合，就使RNA聚合酶可以与启动基因结合，进行转录而合成结构基因所对应的酶。 什么是酶生物合成的反馈阻遏作用？简述其原理。 答：又称产物阻遏作用，指酶催化反应的产物或代谢途径的末端产物使该酶的生物合成受到阻遏的现象。原理：当环境中色氨酸浓度增加，阻遏物达到一定程度时，阻遏蛋白与阻遏物结合，使其结构发生改变，从而使阻遏蛋白与操纵基因的结合力增强。阻遏蛋白与操纵基因结合，就排挤RNA聚合物与启动基因的结合，使转录无法进行，酶的生物合成因此受到阻遏。 简述分解代谢物阻遏作用的原理和解除方法。 答：原理： 酶的生物合成有哪几种模式？ 答：同步合成型延续合成型中期合成型滞后合成型。 如何控制微生物发酵产酶的工艺条件？ 答：（1）细胞活化与扩大培养；（2）培养基的配制；（3）pH的调节控制；（4）温度的调节控制；（5）溶解氧的调节控制：调节通气量调节氧分压调节气液接触时间调节气液接触面积改变培养液性质 提高酶产量的措施有哪些？ 答：1）添加诱导2）控制阻遏物浓度3）添加表面活性剂4）添加产酶促进剂 简述固定化微生物细胞发酵产酶的特点。 答： ①②可以反复使用或连续使用较长的时间；③； 固定化微生物原生质体发酵产酶的特点。 答： *优良的产酶微生物应当具备的条件：①酶的产量高；②产酶稳定性好；③容易培养和管理；④利于酶的分离纯化；⑤安全可靠、无毒性。 *酶的发酵根据微生物培养方式不同：固体培养发酵、液体深层发酵