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专题二 细胞工程 一、植物细胞工程的理论基础---细胞全能性 3.植物组织培养的过程 植物激素调节: (1)、在生长素存在的情况下,细胞分裂素的 作用呈现加强的趋势; (2)、使用顺序影响实验结果: (3)、激素用量的比例影响实验结果: 生长素用量比细胞分裂素用量,比值高时,有利于根的分化、抑制芽的形成;比值低时,有利于芽的分化,抑制根的形成;比值适中时,促进愈伤组织的生长。 人工种子 结构: 人工种皮+人工胚乳+胚状体(不定芽、顶芽、腋芽) 优点: 1、可使自然条件下不结实或结实率低的植物得以繁殖; 2、不受气候、季节、地域的限制,一年四季都可以生产 3、能保持母本的优良性状 4、能快速高效繁殖 5、可人为控制植物的生长发育与抗逆性 在植物组织培养的过程中,为什么要进行一系列的消毒、灭菌,并且要求无菌操作? 植物组织培养所利用的植物材料体积小、抗性差,对培养条件的要求较高。 植物组织培养中用到的培养基含有丰富的营养成分,有利于培养物的生长,然而各种杂菌同样也可以在上面迅速生长。造成培养基污染的因素有很多,一般包括:外植体带菌、培养瓶和各种器械灭菌不彻底、操作人员操作不规范等,所以植物组织培养过程中污染现象经常发生。 培养基一旦被污染,迅速生长的各种杂菌不但会和培养物争夺营养,而且这些杂菌生长的过程中会生成大量对培养物有害的物质,导致培养物迅速死亡,实验前功尽弃。所以在组织培养实验中用到的植物材料和各种器械都要进行彻底地灭菌,实验人员操作一定要规范,避免带入杂菌。 常见育种方式比较 问题 自然界中有一种含有叶绿体的原生动物──眼虫,说明植物的细胞器同样可以在某些动物细胞中存活,请探讨:动物细胞与植物细胞之间可以实现杂交吗?如果理论上可行,请设计出具体实验方案。 异想天开 * 学习目标 1.明确细胞工程的概念 2.细胞工程的分类、植物细胞工程的主要内容 3.植物组织培养技术的基本操作、原理、条件 4.植物体细胞杂交技术的基本操作、原理 细胞工程的概念 指应用细胞生物学和分子生物学的原理和方法,通过某种工程学手段,在细胞整体水平或细胞器水平上,按照人们的意愿来改变细胞内的遗传物质或获得细胞产品的一门综合科学技术。 细胞工程 应用的原理和方法 研究的水平 研究的目的 细胞生物学和分子生物学 细胞整体水平或细胞器水平 按照人们的意愿来改变细胞内的遗传物质或获得细胞产品 概念 分类 植物细胞工程 动物细胞工程 理论基础 细胞的全能性 主要技术 植物组织培养 植物体细胞杂交 动物细胞培养 动物细胞融合 单克隆抗体技术 胚胎移植 核移植 植物细胞工程技术 动物细胞工程技术 异种植物细胞 杂种细胞 转基因植物 异种动物细胞 动物细胞群 重组细胞 体细胞细胞核 早期胚胎 受精卵 去核卵细胞 克隆动物 试管婴儿 动物细胞融合 植物体细胞杂交 植物组织培养 动物细胞培养 核移植 胚胎移植 体外受精 前者是细胞水平或细胞器水平上生物技术, 后者是分子水平上的生物技术。 克隆多莉羊技术是 水平上的技术, 培育抗虫棉是 水平上的技术。 蛋白质工程是 水平上的技术。 细胞工程与基因工程相比: 细胞 分子 思考: 分子 所采用技术的理论基础 植物细胞工程 通常采用的技术手段 植物组织培养 植物体细胞杂交 植物细胞的全能性 已分化的细胞仍具有发育成完整生物个体的潜能。 生物体的每一个细胞都包含有该物种所特有的全套遗传物质,都有发育成为完整个体所必需的全部基因,从理论上讲,生物体的每一个活细胞都应该具有全能性。 1、定义: 2、基础: 3、体内细胞未表现全能性的原因: 基因选择性表达的结果 4、全能性表达的条件(植物组织培养的条件): 离体:离体细胞、组织或器官 适宜的外界环境条件:例如无菌、适宜的温度、湿度、光照等 培养基(一定的营养物质,激素等) 5、全能性的高低: ①受精卵生殖细胞(精、卵)体细胞 ②体细胞:植物细胞动物细胞 ③分化程度低的细胞分化程度高的细胞 ④ 分裂能力强的细胞分裂能力弱的细胞 幼嫩细胞>衰老细胞 有关细胞全能性的叙述,不正确的是( ) A.受精卵在自然条件下能使后代细胞形成完整个体, 因此其全能性最高 B.生物体内细胞由于进行分化,全能性不能表达 C. 卵细胞与受精卵一样,细胞未分化,全能性很高 D.在一定条件下,植物细胞离体培养能表现出全能性 即时应用 C 二、植物组织培养 2、理论基础: 植物细胞的全能性 1、植物组织培养的概念 在无菌和人工控制的条件下,将离体的植物器官、组织、细胞,培养在人工控制的培养基上,给予适宜的培养条
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