耐胆盐格兰阴性菌及车间微生物详解.ppt

2015版耐胆盐革兰阴性菌及车间微生物 知识介绍 北京同仁堂股份南厂QC 一.2015版耐胆盐革兰阴性菌变化 1.耐胆盐革兰阴性菌简介 2.大肠菌群简介 3.大肠埃希菌简介 4.指标的意义 二.车间微生物污染的媒介 1.空气； 2.水；3.表面； 4.人 三.过程控制措施 1.原料控制 2.车间环境监控 (1)空气；(2)水；(3)表面；(4)人 3.取样 4.培训 一.2015版耐胆盐革兰阴性菌变化 1.耐胆盐革兰阴性简介 2.大肠菌群简介 3.大肠埃希菌简介 4.指标的意义 1.耐胆盐革兰阴性菌简介 2015版中国药典用耐胆盐革兰阴性菌检查法替代2010版大肠菌群检查法。耐胆盐革兰阴性菌检查法在检出率和准确率上均比大肠菌群检查法高，检测的菌种范围更广，实验结果易于判断。 定义：耐胆盐革兰阴性菌指在胆汁酸中可以存活并繁殖的革兰阴性菌。 包含分类及来源 肠杆菌科：主要包含大肠菌群，来源于人畜粪便 假单胞菌属：属于假单胞菌科，存在于土壤、水、空气中，人体皮肤、肠道和呼吸道均有存在 气单胞菌属：属于弧菌科，自然界广泛存在，可从土壤及人类粪便中分离 结构图 2.大肠菌群简介 大肠菌群是指在37℃生长时能发酵乳糖，24h内产酸产气的革兰阴性、氧化酶阴性、需氧或兼性厌氧的无芽孢杆菌，它不是分类学上的名称。 大肠菌群包括 埃希菌属（为主） 肠杆菌属 枸橼酸菌属 克雷伯菌属 这些属的细菌均来自于人和温血动物的肠道。  大肠菌群中以埃希氏菌属为主，本群中典型大肠杆菌以外的菌属，除直接来自粪便外，也可能来自典型大肠杆菌排出体外7~30 天后在环境中的变异。 大肠菌群的灭菌 大肠菌群对氯很敏感，在含有0.5～1ppm氯量的水中，很快死亡。 大肠菌群等革兰氏阴性无芽孢杆菌对紫外线最敏感，用15瓦紫外线杀菌灯,距离50cm，照射1分钟，或距离10cm，照射6秒钟，几乎可全部杀死。 大肠菌群在60℃，热死时间为5～30分钟，在70℃，热死时间为5分钟。 3.大肠埃希菌简介 大肠埃希菌，俗名大肠杆菌（ 革兰氏阴性短杆菌），周身鞭毛，能运动，无芽。是人和动物肠道中的正常栖居菌。大肠埃希菌的致病物质之一是血浆凝固酶。肠出血性大肠埃希菌O157:H7是导致1996年日本食物中毒暴发的罪魁祸首，它是出血性大肠埃希菌中的致病性血清型，主要侵犯小肠远端和结肠。 大肠杆菌的代时 大肠杆菌在不同温度下的代时：10度? ?860min15度??120min20度? ?90min25度? ?40min35度? ?22min 大肠杆菌的灭菌 大肠杆菌生长温度范围7～49.5℃，最适生长温度37℃。 致病性大肠杆菌在室温下能生存数周，在土壤和水中可达数月，O157大肠杆菌75℃时，1min即被杀死，但它耐低温。 4.指标意义 检出耐胆盐革兰阴性，表示样品受到污染。 大肠菌群属于人或温血动物的粪便污染，其中典型大肠杆菌为粪便近期污染，其他菌属则可能为粪便的陈旧污染。 可以推测该药品中存在着肠道致病菌污染的可能性（如沙门氏菌、志贺氏菌等）。 二.车间微生物污染的媒介 1.空气 2.水 3.表面 4.人 二.车间微生物污染的媒介 微生物特点： 存在范围广 生长速度快 生存能力强 洁净室内微生物在哪里 空气 水 表面 人员 1.空气中的微生物 在一般空气中，微生物达800~3500cfu/m3， 空气并不是产生污染的介质，但它是污染的危险携带者。 空气中的微生物多数附着在灰尘上，或以芽孢形式悬浮于空气中，1μm（微米）以下者处于悬浮状态，10μm以上者会逐渐沉下来而形成菌尘。 充满微生物的尘埃和水滴就是通过空气作为侵袭我们产品的媒介而成为重要的污染源的。 2.水中的微生物 在严重污染的水中可达107cfu/ml（饮用水要求菌落总数≤100cfu/ml，大肠杆菌、大肠菌群不得检出）大肠杆菌经水塔或蓄水池储存后，短期内可大量繁殖繁殖 在生产过程中，水是用量最大、应用最广泛的辅料之一。 微生物在纯水中不能生长，但是水中总会有一定量的可溶性有机物和盐类被微生物利用作为他们的生长养料。 3.表面的微生物 空气中的湿度，使表面包裹上一层水膜，这层薄膜由于静电吸引而饱含尘埃