【2017年整理】乳粉中还原糖含量的测定直接滴定法.docVIP

PAGE PAGE 1 实验六 乳粉中还原糖含量的测定—直接滴定法 （GB/T5009.7—2003第一法） 教学目的要求： 基本知识点 1、掌握直接滴定测定还原糖的原理、基本过程和操作关键。 2、熟练称量、过滤、定容、滴定等基本操技术。 重点： 1、熟练称量、过滤、定容、滴定等基本操技术 2、直接滴定测定还原糖的原理、基本过程和操作关键。 难点： 直接滴定测定还原糖的原理和控制要点 课时教学方案： 复习与提问： 1、检查实验准备情况， （1）实验内容； （2）实验仪器与试剂有哪些？ （3）直接滴定测定还原糖的步骤。 2、直接滴定测定还原糖的注意事项和控制要点 【引入新课】 乳糖是半乳糖经β-1，4糖苷键与葡萄糖结合的还原性二糖，称为4-O-β- d吡喃半乳糖-d-吡喃葡萄糖，还原基在葡萄糖单位上。乳糖有两种异构体，即α-乳糖和β-乳糖。 乳糖 是唯一没有在植物中发现的糖，因首次在牛乳中发现，故称为乳糖。乳糖是哺乳动物乳汁的主要成分，如人乳中约含6%～7%，牛乳中约含5%。乳糖是婴儿主要食用的糖类物质。初生婴儿仅能消化乳糖、蔗糖、葡萄糖、果糖，对淀粉不易消化，故米、面淀粉食物应在3～4个月后才开始添加。乳糖对婴儿的重要意义还在于它能够保持肠道中最合适的肠菌种数，并能促进钙的吸收。随着年龄的增大，肠道中将乳糖分解为葡萄糖和半乳糖的乳糖酶活性急剧下降，甚至在某些个体中几乎降到0，因而成年人食用大量的乳糖，不易消化，食物中乳糖含量高于15%时可导致渗透性腹泻。 一、目的要求 1、理解直接滴定法测定还原糖的原理及操作要点； 2、熟练称量、过滤、定容、滴定等基本操技术。 二、实验原理 试样经除去蛋白质后，在加热条件下，以次甲基蓝作指示剂，滴定标定过的碱性酒石酸铜溶液（用还原糖标准溶液标定碱性酒石酸铜溶液），还原糖将溶液中的二价铜还原成氧化亚铜。以后稍过量的还原糖使次甲蓝指示剂褪色，表示终点到达。根据试样溶液消耗体积，计算还原糖量。反应方程式如下： CuSO4+2NaOH=Cu(OH)2↓+Na2SO4 COONa COONa ︱ ∣ CHOH CHO╲ ∣ +Cu(OH)2= ∣ Cu +2H2O CHOH CHO╱ ∣ ∣ COOK COOK COONa COONa ∣ CHO ∣ CHOH CHO╲ ∣ CHOH ∣ 2∣ Cu +(CHOH)4 +2H2O=2 ∣ + (CHOH)4+Cu2O↓ CHO╱ ∣ CHOH ∣ ∣ CH2HO ∣ CH2OH COOK COOK 亚甲蓝氧化型+还原糖——→亚甲蓝还原型 (蓝色) （无色） 三、实验试剂（GB/T5009.7-2003食品中还原糖的测定） 1、盐酸。 2、碱性酒石酸铜甲液：称取15g硫酸铜 ( CuSO4?5H2O) 及0.05g次甲基蓝，溶入水中并稀释至1000mL。 3、碱性酒石酸铜乙液：称取50g酒石酸钾钠及75g氢氧化钠，溶于水中，再加入4g亚铁氰化钾，完全溶解后，用水稀释至1000mL，贮存于橡胶塞玻璃瓶内。 4、乙酸锌溶液：称取21.9g乙酸锌，加3mL冰乙酸，加水溶解并稀释至100mL。 5、亚铁氰化钾溶液：称取10.6g亚铁氰化钾，加水溶解并稀释至100mL。 6、葡萄糖标准溶液：准确称取1.000g经过96℃±2℃干燥2h的纯葡萄糖，加水溶解后加入5mL盐酸，并以水稀释至1000mL。此溶液每mL相当于 提示： （1）此法所用的氧化剂碱性酒石酸铜的氧化能力较强，醛糖和酮糖都能被氧化，所测得是总还原糖含量。 （2）本法是根据经过标定的一定量的碱性酒石酸铜溶液（Cu2+ 量一定）消耗的试样溶液量来计算试样溶液中的还原糖的含量，反应体系中Cu2+ 的含量是定量的基础，所以在试样处理时，不能用铜盐作为澄清剂，以免试样溶液中引入Cu2+ ，得到错误的结果。 （3）次甲基蓝本身也是一种氧化剂，其氧化型为蓝色，还原型为无色；但在测定条件下，它的氧化能力比Cu2+弱，故还原糖先与Cu2+ 反应， Cu2+ 完全反应后，稍微过量一点的还原糖将次甲基蓝指示剂还原，使之由蓝色变为无色，指示滴定终点。 （4）为消除氧化亚铜沉淀