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第三课时 纯化大肠杆菌[精选]
2．溶化 3．调pH： pH7．6 4．过滤：这一步可以省去。 5．加塞 6．包扎 选择培养基 加入青霉素的培养基: 分离酵母菌、霉菌等真菌 加入高浓度食盐的培养基: 分离金黄色葡萄球菌 不加氮源的无氮培养基: 分离固氮菌 不加含碳有机物的无碳培养基: 分离自养型微生物 加入青霉素等抗生素的培养基: 分离导入了目的基因的受体细胞 加入氨基喋呤、次黄嘌呤和胸腺嘧啶核苷的培养基: 分离杂交瘤细胞 问题讨论 若硝化细菌、圆褐固氮菌、不固氮的蓝藻混合在一起，我们配置什么样的培养即可以将三种微生物分离？ * 专题2 :微生物的培养与应用 淮北市天一中学 生物组 李伟 三、实验操作 （一）制备牛肉膏蛋白胨培养基（用于培养细菌） 1．计算、称量 操作步骤 7．灭菌: 高压蒸气灭菌 8．倒平板: 待培养基冷却到50 ℃左右时，在酒精灯附近倒平板。（倒平板操作见课本）2d后观察平板，无杂菌污染才可用来接种. 9．无菌检查： 将灭菌的培养基放入37℃的温室中培养24—48小时，以检查灭菌是否彻底。 （二）纯化大肠杆菌 接种方法有： 平板划线法 稀释涂布平板法 微生物的接种技术： 平板划线的操作 一旦划破，会造成划线不均匀，难以达到分离单菌落的目的； 二是存留在划破处的单个细胞无法形成规矩的菌落，菌落会沿着划破处生长，会形成一个条状的菌落。 稀释涂布平板法 本课题知识小结: 光 铵盐、硝酸盐 CO2 不固氮的蓝藻 有机物 N2 糖类等含碳有机物 圆褐固氮菌 氨 氨 CO2 硝化细菌 能源 氮源 碳源 倒平板技术 1.培养基灭菌后，需要冷却到50 ℃左右时，才能用来倒平板。你用什么办法来估计培养基的温度？ 答：可以用手触摸盛有培养基的锥形瓶，感觉锥形瓶的温度下降到刚刚不烫手时，就可以进行倒平板了。 2.为什么需要使锥形瓶的瓶口通过火焰？ 答：通过灼烧灭菌，防止瓶口的微生物污染培养基。 * * *
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