荧光原位杂交(FISH)研究.pptVIP

（Fluorescence in situ hybridization,FISH） 原位杂交（ISH） 原位杂交 (in situ hybridization, ISH) 将标记的核酸探针与细胞或组织中的核酸进行杂交。 原位杂交技术(ISH)是分子生物学、组织化学及细胞学相结合而产生的一门新兴技术，始于20世纪60年代。 使用DNA或者RNA探针来检测与其互补的另一条链在细菌或其他真核细胞中的位置。 基本原理 根据碱基互补配对原则，同源的DNA-DNA、DNA-RNA和RNA-RNA两条单链在一定条件下能结合成双链。用放射性或非放射性物质标记的DNA、RNA或与mRNA互补的cDNA作探针，与组织切片或细胞内待测核酸(RNA或DNA）片段进行杂交，然后可用放射自显影等方法予以显示，在光镜或电镜下观察目的 mRNA或DAN 的存在与定位。 3H、35S、125I、32P等 同位素原位杂交的不足之处： 1、不稳定 2、高背景 3、曝光时间长 4、结果统计处理繁琐 5、同位素的使用和处理 几种原位杂交技术 1 基因组原位杂交技术 2 荧光原位杂交技术 3 多彩色荧光原位杂交技术 4 原位PCR 荧光原位杂交 荧光原位杂交（Fluorescen