过氧化氢酶活性 演示文稿[精选].pptVIP

过氧化物酶活性测定 一、实验目的： 学习和掌握过氧化物酶(POD)活性测定的原理及方法。 二、实验原理: 在通常情况下，需氧生物在还原氧至水的过程中会产生氧气，植物细胞中电子传递不通畅时，会产生一系列活性氧（超氧阴离子自由基，羟自由基，单线态氧，过氧化氢），会直接或间接启动膜脂过氧化作用，导致膜的损伤和破坏。 过氧化物酶广泛存在于植物体中，是生物体内存在的一种防护氧自由基对细胞膜系统伤害的酶，在细胞膜产生过氧化物的破坏有保护作用，在植物生长发育过程中它的活性不断发生变化。 器材与试剂 1 实验仪器：分光光度计，离心机，秒表，天平，研钵。 2 实验试剂：50mmol/L磷酸缓冲液, 50mmol/L愈创木酚溶液，2%过氧化氢。 3 实验材料：小麦（营养液，盐胁迫）。 实验步骤 1.粗酶液的提取 称取植物材料0.5g，加5ml50mmol/L 磷酸缓冲液,于研钵中研磨成匀浆，以4000r/min离心15min，残渣再用5ml 磷酸缓冲液提取一次，合并两次上清液,25ml容量瓶定溶，保存在冷处。 2.酶活性的测定 取光径1cm比色杯2只，于1只中加入磷酸缓冲液1ml, 50mmol/L愈创木酚溶液1ml，2%过氧化氢1ml，作为校零对照；另一只加入50mmol/L愈创木酚溶液1ml，2%过氧化氢 1ml，上述酶液1ml（如酶活性过高