基于cpSSR标记的红松天然群体交配系统的研究.docVIP

东北林业大学 硕士学位论文 基于cpSSR标记的红松天然群体交配系统的研究 姓名：赵丹 申请学位级别：硕士 专业：森林植物资源学 指导教师：穆立蔷；冯富娟 201106  要 以黑龙??：省伊春市血营区丰林国家级自然保护区天然红松林为研究对象，利用 ???肿颖昙欠椒ㄒ匝∪〉??黾蚁档??个自由授粉子代为研究对象，对红松天 然种群的交配系统进行研究。 通过传统的??法提取红松胚??案牧嫉腃??ㄌ崛∨呷榈腄?，结果表 的??洗浚?鞍字省⒍嗵呛头永嗟仍又驶?救コ??竦昧烁咧柿康幕?蜃镈?，满 足了实验的需要。 利用证交设计与单因子试验相结合的方法对影响红松???甈?反应体系的 计。通过综合比较分析，筛选出各反应因素的最佳水平，建立红松???狿?最 佳反应体系。在此基础上从?对引物中筛选出?醵嗵?院谩⒗┰鑫榷ǖ腸??引 利用筛选出的?醵嗄顃卜较高的????锒??个自?授粉子代样本进行扩增。 』芝扩增出?个位点，?阬?多念性位点为?个，各个引物获得的多态性位点数在?? ?得出红松天然群体具有中度偏离的多态性；群 体的?均观测杂合度?为?????骄?谕?雍隙菻??．??，观测杂合度偏高： 子代群体刚天然群体亲代棚比，各项多样性参数桐近，遗传多样性并没自．降低。 通过对红松天然群体进行交配系统分析， 得出多位点异交率为 单位点异交率 ??．????．??，  ???? ??? ??????? ????， ?????甌? ??? ? ????? ?? ??? ??? ? ? ?? ? ??? ? ??? ? ?? ??????? ?????瑃? ????? ?????． ? ????瑃? ??????? ? ???? ??琈??琩??，??? ???甈? ????? ? ?????狿????? ??? ?????????? ? ??? ????????瓵? ? ????．? ?? ???? ?? ?? ??? ??? ? ??? ? ? ??? ?? ?? ?????? ? ????? ? ? ????? ?? ? ? ??? ? ???? ?? ???? ????????????????． ??????? ???? ??， ? ????? ?????；??????  遗传标记是指可追踪染色体、染色体某一阶段或者某个基因座在家系中传递的任何 一种遗传特性。遗传标记具有两个基本特征，即可遗传性和可识别性。因此，生物中任 型，即形态学标记、细胞学标记、生化标记和分子标记。其中，形态学标记、细胞学标 记和生化标记都是以基因表达的结果为基础的，是对基因的??認接反映；而分子标记则是 形念学标记是指植物的外部形态特征。孟德尔????以豌豆为材料详细研究了 ?韵喽孕宰吹囊糯ü媛桑?对性状都具有典型的很容易识别的外部特征，构成了最早 的遗传标记。这一标记使孟德尔可以对杂种后代不同个体的性状进行归类研究，并提出 了分离规律和独立分配舰律两个遗传定律。 形念主要包括肉眼可见的的外部特征，如：矮秆、紫鞘、卷叶等；也包括色素、生 理特性、抗病虫性等有关的一些特性。形态标记的特点是简单直观、经济方便等优点。 但形态标也的数量在多数植物中是有限的，多态性比较差，表型易受环境的影响。 细胞学标记的是植物细胞染色体的变异。它包括染色体核型和带型的变化。染色体 细胞学标记的优点是能进行一些重要摹因的染色体或染色体区域定位。但是细胞学 标记材料需要较多的人力、物力和比较长的时间来培育，难度大；某些植物物种对染色 体变异反应太敏感；有些变异很难利用此方法进行检测。 的不同形式，而等位酶是指由一个基冈座位的不同等位基因编码的酶的不同分子形式。 生化标记通常具两个方面的优点：一是直接反映了基因产物差异；二足表现近中 性。但目自订可使用的尘化标记标记数量还相当有限，是因为具有酶的染色方法，以及电 泳分离技术方面有一定的难度，因而在应用方面上有一定的限制，不能成为比较理想的 遗传标记方法。  的长短重复序列等机制，从而产生的多态性。 整个基因组；表现为共显性；多态性高。 ??．?????????????? ??? ??标记原理是：用限制性内切酶酶解样品???ü??旱缬窘獶?片段按 照各自的长度分开。通过???? 单链与支持膜牢固结合，再用经同位素或地高辛标记的探针与膜上的酶切片段分子杂 交，通过放射自显影显示出杂交带，即检出限制性片段长度多念性。 ??标记是一种共显性标记；非等位??标记之间不存在上位效应，结果稳定 探针的制备、保存和发放很不方便，影响人体健康，污染环境，其推广使用受到了一定 的限制。 ??．?? 应用于植物和其他领域的研究中。 ??标记的优点主要是：无需专门设计??扩增反应的引物，随机设计的长度 物可以应用于任意一种生物的研究，